基础化学徐祥主编第十三章 吸光光度法.ppt

第一节 吸光光度法的基本原理 第二节 光吸收的基本定律 第三节 吸光光度法分析条件的 选择 第四节 分光光度计 第五节 可见吸光光度法的应用 ; 吸光光度法是基于物质对光的选择性吸收而建立的一种分析方法，包括比色法、可见吸光光度法、紫外吸光光度法和红外光谱法等。 吸光光度法属于仪器分析方法，它所测定的是物质对光的吸收程度。 吸光光度法主要具有以下特点： （1）测定的灵敏度高。常用于测量质量分数为 10-3 ％ ~ 1％ 的微量组分，甚至可测定质量分数低至 10-5 ％ ~ 10-4 ％ 的痕量组分。 （2）测定的准确度较高。一般吸光光度法测定的相对误差为2％ ~ 5％，若使用精密仪器，相对误差可降至1％ ~ 2％，完全可以满足微量组分测定的要求。; （3）仪器设备简单，操作简便、快速，选 择性好。由于新的显色剂和掩蔽剂不断发现，提高了选择性，一般不需分离干扰物质就能进行测定。 （4）应用广泛。几乎所有的无机离子和具有共轭双键的有机化合物都可以直接或间接地用吸光光度法进行测定。;第一节 吸光光度法的基本原理; 一、光的基本性质;近红外 ;二、溶液对光的选择性吸收;物质的颜色 ; 三、吸收曲线;; 吸收曲线中吸光度最大时所对应的波长称 为最大吸收波长 。当溶液的浓度不同时，其吸收曲线的形状和 的位置不变，只是同 一波长下的吸光度随溶液浓度的变化而发生变化。吸收曲线是吸光光度法选择测定波长的重 要依据。 ;第二节 光吸收的基本定律; 一、Lambert-Beer 定律;1760 年， Lambert 指出：一束平行单色光通过有色溶液后，光的吸收程度与溶液液层的厚度成正比。 A = k1· d 1982年，Beer 指出：一束平行单色光通过有色溶液后，光的吸收程度与溶液的浓度成正比。 A = k2 · cB 将 Lambert 定律和 Beer 定律合并起来，就得到 Lambert-Beer 定律。 ;例13-1 用邻菲罗啉法测定铁，已知 Fe2+ 的质量 浓度为 1.0 10-3 g·L-1。用2cm吸收池，在波长508 nm 处测得吸光度A 为0.38，计算铁 邻菲罗啉 配离子的摩尔吸收系数。 解：Fe3+浓度为： ; 若溶液的组成用质量浓度表示。Lambert-Beer 定律可表示为： κ 与 a 的关系为： 溶液中含有多种吸光物质时，若吸光物质 之间没有相互作用，则溶液吸光度等于各吸光 物质的吸光度之和。 ; 二、偏离 Lambert-Beer 定律的原因;标准曲线的偏离; 1. 非单色光引起的偏离 假设入射光仅由波长为 和 的两种单色 光组成， 其强度分别为 I01 和 I02 ，当通过浓度 为cB，厚度为d 的吸光物质溶液后，透射光的强 度分别为 I1 和 I2。 ;对波长为 的单色光： 对波长为 的单色光： ;实际测定时，只能测得它们的总吸光度 A总。由于总入射光强度为 I01＋I02，总透射光强度为 I1＋I2 ，故： ;即总吸光度 A总与浓度 cB仍服从 Lambert- Beer 定 律。此结论可能对应以下两种不同的情况： （1） 很小，可近似认为 ， 入射光近似为单色光，故 A 与 cB仍成正比。 （2）尽管 较大，但在所选择的入射光波长 范围附近吸收曲线较平坦，因此κ变化较小，故 A 与 cB仍保持较好的线性关系。 若 较大时， 不等于 ，则 A 与 cB 不 成正比而偏离 Lambert-Beer 定律， 与 相差 越大，偏离就越显著。 ;2. 非平行入射光引起的偏离 若入射光束为非平行光，就不能保证光束 全部垂直通过吸收池，可能导致光束通过吸收 池的实际平均光程大于吸收池的厚度，使实际 测得的吸光度大于理论值，从而导致与 Beer 定律产生正偏离。 ; 3. 介质不均匀引起的偏离 若溶液中生成溶胶或发生浑浊，当入射光通过该溶液时，除一部分被吸光物质吸收外，还有一部分被溶胶粒子和粗分散粒子散射而损失，使透光率减小，实测的吸光度偏高，从而对