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对羟基苯甲酯类混合物的反相高效液相色谱分析
实验103 对羟基苯甲酸酯类混合物的反相高效液相色谱分析;103.2 实验原理; 本实验采用归一化法定量,归一化法使用条件及计算公式,与气相色谱分析法相同。而对羟基苯甲酸酯类混合物属同系物,具有相同的生色团和助色团,因此它们在紫外光度检测器上具有相近的校正因子,可用下式:;103.3 实验条件;色谱条件:;103.4 实验步骤 ;103.5 实验数据记录与处理;3.测量未知试样色谱图上各组分的峰高h,半峰宽Y1/2,计算各组分的峰面积A及其含量wi,并将数据列于下表中:;103.6 注意事项;103.7 问题讨论;103.8 参考答案; (2)本实验为什么采用反相液相色谱,试说明理由。
答:流动相极性大于固定相极性的色谱称为反相色谱,反之称为正相色谱。本实验所用样品均为极性化合物,依据“相似相溶”原则,宜选用极性固定相、非极性的流动相,即选择正相色谱。但是,高效液相色谱的可贵之???是它的分离效能很高,对于极性化合物往往用反相色谱也能实现很好的分离,而且,反相色谱的流动相通常使用甲醇和水,价格远低于正相色谱通常使用的正己烷。; (3)高效液相色谱分析的流动相为何要脱气,不脱气对实验有何妨碍?
答:流动相应该先脱气,以免在泵内产生气泡,影响流量的稳定性,如果有大量气泡,泵就无法正常工作;另外,如果在检测器中产生气泡,会造成基线波动或异常出峰。
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