北五味子多糖的提取和含量测定论文.docVIP

　　北五味子多糖的提取和含量测定论文 【摘要】 目的建立提取和测定北五味子中多糖含量的方法。方法采用比色法测定北五味子中多糖含量。结果测得北五味子中多糖含量为6.57%，平均回收率为99.78%，RSD=1.54%。结论 该方法简便、精密度及重现性均较好，结果令人满意。 【关键词】 北五味子 多糖 提取 含量测定 Extraction and Determination of Polysaccharide from Schisandra chinensis (Turcz) Baill Fruit Abstract：ObjectiveTo establish a method for the extraction and detemination of polysaccharide from Schisandra chinensis (Turcz) Baill Fruit.MethodsPolysaccharide in Schisandra chinensis (Turcz) Baill Fruit ined by the method of Spectrophoto metry.ResultsThe polysacharides in Schisandra chinenisis (Turcz) Baill Fruit ethod is simple，the result is stable，reproducible,.freelination 北五味子Schisandra chinensis(Turcz）Baill Fruit是木兰科植物五味子的干燥成熟果实，是著名的滋补性中药，因其果实甘、酸、辛、苦、咸五味俱全.freelg，用蒸馏水溶解并定容到100 ml。 2.2 苯酚溶液的配制取苯酚100 g，加铝片0.1 g和NaHCO3 0.05 g，蒸馏，收集182℃馏份，称取7.5 g，加水150 ml溶解，置棕色瓶内放冰箱备用。 2.3 测定条件选择 2.3.1 反应温度选择精密吸取葡萄糖储备液1.0 ml于100 ml容量瓶中，用水稀释至刻度，作为对照品溶液。分别吸取葡萄糖对照品液1.0 ml于两个具塞试管中，各加苯酚液1.0 ml，并分别迅速滴加浓硫酸5.0 ml。另取两份1.0 ml水同上操作，为空白液。一份于水浴中煮沸15 min，另一份于40℃水浴中恒温30 min取出，冷却至室温，15 min后于490 nm处测其吸光度值，分别为0.112和0.126。因此，本实验采用40℃恒温30 min的方法。 2.3.2 苯酚及硫酸用量选择吸取葡萄糖对照品液1.0 ml5份，分别加入苯酚液0.2，0.4，0.6，0.8，1.0 ml，分别加水至2.0 ml，再各滴加浓硫酸5.0 ml，40℃恒温30 min后，测其吸光度值，分别为0.095，0.112，0.125，0.127，0.126，可见加入苯酚液0.6 ml以上时，反应都能完成；另取葡萄糖对照品液1.0 ml5份，分别加苯酚液1.0 ml，再分别滴加浓硫酸2.0，3.0，4.0，5.0，6.0 ml，并均用水稀释至8.0 ml，加入硫酸体积占总体积的62.5%以上时的结果较满意。 2.3.3 反应时间选择及稳定性取葡萄糖对照品溶液1.0 ml3份，各加苯酚液1.0 ml，浓硫酸5.0 ml，于40℃分别恒温20，30，40 min。测得吸光度值分别为0.16，0.125，0.126，可见加热30 min即可使反应完全。另测反应完成后样品在不同时间内的吸光度值，结果3 h内稳定。 2.4 标准曲线绘制精密量取葡萄糖标准溶液0.1，0.2，0.3，0.4，0.5，0.6 ml置具塞试管中，分别加蒸馏水使成1.0 ml，再分别加入苯酚溶液1.0 ml，摇匀，然后加浓硫酸5.0 ml，充分摇匀，于40℃水浴中恒温30 min，取出，冷却至室温，另以蒸馏水同上操作为空白对照，在490 nm处测定吸光度，绘制标准曲线，建立回归方程：A=0.067 81C+0.006 204 71，r=0.999 8。 2.5 精密度实验精密吸取对照品溶液1.0 ml，6份，同2.4项下操作，结果显示吸光度的RSD=1.45%。 2.6 多糖的提取流程北五味子粉碎后，称取500 g，用清水洗净，加水4 500 ml，微沸煎煮1 h。过滤，滤渣加水2 000 ml，煎煮1 h，过滤，合并提取液，加热浓缩至300 ml。加入乙醇使乙醇含量为80%放置12 h，抽滤，沉淀依次用无水乙醇、丙酮反复洗涤，得到棕色粗多糖。将粗多糖溶于水，用seveg法除去蛋白，加入1%活性碳脱色，抽滤，滤液加入乙醇，使溶液含醇达80%，静置过夜，抽滤，残渣用无水乙醇、丙酮反复洗涤，真空干燥，即得