刺五加药材指纹图谱的分析方法研究论文.docVIP

　　刺五加药材指纹图谱的分析方法研究论文 高阳， 赵云丽， 毕开顺， 于治国 【关键词】 刺五加；,,高效液相色谱；,,指纹图谱 摘要：目的采用高效液相色谱（HPLC）法建立了刺五加药材指纹图谱。方法色谱柱: Zorbax SBC18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），流动相∶乙腈水（梯度洗脱），检测波长：203 nm，柱温：40℃.freell/min，分析时间：90 min。结果共标示出刺五加药材指纹图谱中24个共有峰。利用指纹图谱相似度测试软件，以夹角余旋为测度，测得10批刺五加药材指纹图谱相似度结果均在0.90～1.00之间。结论本实验所建立的刺五加药材指纹图谱分析方法准确、重复性好，为有效控制刺五加药材的质量提供了依据。 关键词：刺五加； 高效液相色谱； 指纹图谱 Studies on the Analysis Methods of Chromatographic Fingerprints of Acanthopanax senticosus Harms Abstract：ObjectiveTo establish chromatographic fingerprint of Acanthopanax senticosus Harms by HPLC. MethodsSeparation ed on an Agilent ZORBAX SBC18 (4.6 mm×250 mm, 5 μm) analytical column obile phase consisting of acetonitrile and l/min and the column temperature 40℃. The UV and the analysis time in.Results24 copeaks on the HPLC fingerprints of Acanthopanax senticosus Harms ilarities ined by cosine. The results of similarity analysis ethod can be used for the quality control of Acanthopanax senticosus Harms. Key s; HPLC; Chromatographic fingerprint 刺五加Acanthopanax senticosus Harms为五加科五加属植物刺五加的干燥根及根茎，具有益气健脾、补肾安神的功效。现代化学成分及药理实验表明［1，2］，刺五加总皂苷和刺五加多糖是其主要生物活性成分，具有抗癌、抗疲劳、抗肿瘤、免疫调节和解毒的药理活性。因此，建立刺五加药材有效的质量评价方法，不仅可确保刺五加药材质量稳定，还直接关系到刺五加相关的药品和临床处方的疗效。近年来，指纹图谱技术被用于中药的质量控制［3］，其优点在于可全面反映中药复杂的化学成分及其相对比例，在大多数中药有效成分尚未阐明的现状下，仍可有效地表征中药质量。本文采用反相高效液相色谱法，建立刺五加药材指纹图谱，为刺五加的质量控制提供有效的方法。 1 仪器与试药 日本Shimadzu LC10AT高效液相色谱仪，SPD10AT紫外检测器，美国Suntek Science ANASTAR色谱工作站；电热恒温水浴锅（上海医疗器械五厂）；DL180超声波清洗仪（浙江省象山县石浦海天电子仪器厂）紫丁香苷（11574200201，中国药品生物制品检定所），刺五加药材均由贵州益制药股份有限公司刺五加药材GAP生产基地提供。乙腈为色谱纯，水为二次重蒸水，乙醇、甲醇均为分析纯。 2 方法 2.1 色谱条件色谱柱Zorbax SBC18（250 mm×4.6 mm，5 μm），以乙腈水为流动相梯度洗脱，运行时间90 min，0 min时，乙腈为3%，0～20 min乙腈从3%变化到5%，20～30 min乙腈从5%变化到11%，30～90 min乙腈从11%变化到24%；柱温40℃；流速1.0 ml/min；检测波长203 nm；进样量20 ml。 2.2 溶液的制备 2.2.1 供试品溶液的制备 取刺五加药材约10 g，精密称定，加入100 ml水煎煮3次，2 h/次，滤过，合并滤液，旋转蒸发浓缩，加入95%乙醇使含醇量为75%，静置过夜，抽滤，滤液置旋转蒸发仪回收溶剂，残渣用水溶解并定量置5 ml量瓶中，摇匀，再用正丁醇萃取5次，5 ml/次，取正丁醇层，旋转蒸发回收溶剂，残渣中精密加入2 ml水溶解，过滤，0.45 mm微孔滤膜过滤，取续滤液备用。 2.2.2 对照品溶液的制备精密称取真空干燥的紫丁香苷对照品适量，加甲醇制成每毫升中含10.46 mg紫丁香苷的对