应激性生殖内分泌功能低下动物模型论文.docVIP

　　应激性生殖内分泌功能低下动物模型论文 摘要 目的：观察应激对动物生殖内分泌的影响，建立符合临床需要的生殖内分泌紊乱的动物模型。方法：用悬吊和制动方法造成动物急性或重复应激状态，用放射免疫结合的方法测定血浆有关性激素的水平，用阴道涂片的方法观察雌性动物的性周期，用常规方法观察雄性动物的性行为。结果：急性制动应激和急性悬吊应激1，2，3 h均能使雄性小鼠血浆睾酮水平显著降低,皮质酮水平则明显升高。大鼠急性制动应激3 h，可见血浆睾酮水平及睾丸中合成酶17α-羟化酶、17,20-羟甾脱氢酶和3β-裂解酶活性显著降低.freell茶色瓶中，完全限制其自由活动即制动应激1～3h，应激期间不影响动物自由呼吸。应激结束即刻取血，肝素抗凝，分离血浆，用放射免疫结合方法测定血浆睾酮及皮质酮水平。 1.2 小鼠悬吊应激性睾酮水平低下模型 取性成熟昆明种小鼠，体重36～38g，室温20～23℃，光照（14h光∶10h暗），适应环境3d, d4上午9∶00，以小鼠尾部为支点，将其悬吊于水面上，水温(25±1)℃，水深20 cm，悬吊高度以小鼠前肢刚接触水面为度，悬吊时间1～3 h，应激结束即刻取血，肝素抗凝，分离血浆，用放射免疫结合方法测定血浆睾酮及皮质酮水平。 1.3 大鼠制动应激性睾丸功能低下模型 取性成熟SD大鼠，体重230～250g，室温20～23℃，光照（14h光∶10h暗），适应环境3d, d4上午9∶00将动物置于透明的聚乙烯圆锥形的制动应激装置中，使头部朝圆锥方向，圆锥大小以完全限制动物活动为度，位于动物鼻部的圆锥体处，开一直径1 cm的孔，以保证动物自由呼吸，如此应激3 h 。 2 重复应激性生殖内分泌功能低下模型 2.1 重复应激性小鼠性行为低下动物模型 取性成熟昆明种小鼠，体重36～38g，室温20～23℃，光照（14h光∶10h暗），适应环境3d。悬吊方法同前，悬吊1次/d，连续12d，并通过循序延长悬吊时间增加应激强度, d1～d3悬吊2h/d，d4～d6悬吊3h/d，d7～d9悬吊4h/d，d10～d12悬吊5h/d，每天应激时间安排在上午9∶00～下午2∶00。d6下午7∶00～9∶00开始观察每天应激后及末次应激恢复24h后15 min内性行为，即舔吻、跨骑、交配的潜伏期、发生数及发生率,部分动物于末次应激后30 min取血，肝素抗凝，分离血浆供血浆中睾酮及皮质酮水平测定。 2.2 重复应激性雌小鼠性周期失常、雌二醇降低模型 取性成熟昆明种雌性小鼠，体重34～36g，室温20～23℃，光照（14h光∶10h暗），每天上午7∶30～8∶30阴道涂片，连续15d。选择有规律性周期的动物，悬吊方法同前，悬吊1次/d，连续12d，并通过循序延长悬吊时间 增加应激强度，d1～d3悬吊1h/d,d4～d6悬吊2h/d,d7～d9悬吊3h/d，d10～d12悬吊4 h/d。每天应激时间安排在上午9∶00～12∶00。应激期间继续每天阴道涂片，观察性周期应激性变化。于应激后第2个动情期，取血，肝素抗凝，分离血浆，用放免法观察血浆中雌二醇水平应激性变化。 结 果 1 急性应激性睾酮水平低下模型 急性制动应激和悬吊应激1,2,.freelate stressor.Stress Med, 1998,14∶109 ［2］Roch PJ. Stress and Aging.Stress Med,1997,13∶69 ［3］Sommer B. Stress and menstrual distress. J Human Stress,1978,9∶5 ［4］Modell E, Goldstein D, Reyes FI. Endocrine and behavioral responses nb sp;to psychological stress in hyperandrogenic en.Fertil Steril,1990, 53∶454 ［5］Bille BMK, Federoff HJ, Koenig JI,et al. Abnormal cortisol secretion and responses to corticotropin-releasing hormone in en ic amenorrhea.J Clin Endocrinol Metab,1990, 70∶3112 ［6］Russell GFM. Psychological and nutritional factors in disturbance of menstrual function and ovulation.Postgrad Med J, 1972,48∶10 ［7］Demyttenaere