活体蛋白质功能光学分子成像新技术新方法.PDFVIP

国家重大科学研究计划(2011CB910400) 活体蛋白质功能的光学分子成像新技术新方法 2014年12月项目年度总结简报 本项目“活体蛋白质功能的光学分子成像新技术新方法”共设有4个课题，以活 体内蛋白质功能的光学表征与跨层次信息整合为关键科学问题，系统开展光学成像 技术、光学分子探针、光学标记方法、信息处理与可视化等方面的研究，建立活体 蛋白质功能的光学分子成像研究新体系。2014年度共发表SCI论文38篇。申报专利2 项，获得授权专利5项。按照2014年项目和课题的任务书，四个课题的年度计划完成 情况分别如下。 课题1： 活体微环境中多蛋白质分子事件快速并行检测的飞秒激光扫描显微成像 课题组成员在本年度围绕着课题的研究目标与计划，取得了一系列的成果。在活 体跨层次免疫光学成像和肿瘤免疫模型方面：建立了活体多层次光学成像研究免疫 细胞的募集、分布和运动特性的新方法；发展基于四聚体荧光蛋白的可视化荧光模 型抗原系统，为特异性免疫应答的活体可视化研究提供了新工具; 应用具有肿瘤特异 性治疗作用的多肽-脂质纳米颗粒，进行活体肿瘤微环境的免疫光学成像研究；建立 了光子晶体光纤产生的连续光谱的选择性激发双光子荧光成像，解决了多色双光子 荧光显微成像中多色最优激发和光谱串扰等问题。在活体光学成像新技术新方法方 面：提出基于电动聚焦透镜的多尺度光声显微成像方法，在一套系统中实现从光学 分辨到声学分辨的光声成像；提出一种基于再权重L1 正则化的方法，有效降低活体 小动物荧光分子层析成像的伪影，提高成像质量，且缩短图像重建的时间复杂度和 空间复杂度；深入研究了弱光相机的固定图案噪声对单分子定位的影响，发现单分 子定位中的伪像来源于高数值读出噪声而不是固定图案噪声。2014 年发表SCI 收录 期刊论文共11 篇，其中1 篇IF 10 、2 篇IF 5 、3 篇OE/OL 。 课题2：基于高分辨光声成像的蛋白质功能信息的跨层次多尺度获取与整合 课题组搭建光声、荧光双模跨层次多尺度成像系统平台, 利用变焦透镜搭建了轴 向快速可变焦光声显微成像系统；使用同一个激光光源，结合共焦扫面结构，建立 - 1 - 国家重大科学研究计划(2011CB910400) 光声、荧光同时成像系统；研究荧光接收与超声采集的空间布局，拟确立实验的最 优化方案；开展蛋白质功能信息的实验研究，根据实验实际效果调整实验平台，改 善系统性能。目前光声、荧光双模多尺度成像系统已经建立，并已利用光声-荧光互 补原理关系开展活体深层钙离子浓度已经活体探针靶向效率的实验研究。发表 SCI 文章11 篇，包括JACC, PNAS 等，授权专利5 项。 课题3 ：用于活体光学成像的分子探针与标记方法 继续推进高性能荧光分子探针、光声分子探针及多色荧光纳米粒子的研发；同时， 所发展的高性能化学探针在蛋白功能成像中的应用逐步展开。目前，相关工作基本 按原定计划完成。此外，本年度还重点发展了短肽或糖介导的特异性靶向标记/识别 新技术，为发展高生物相容性的多元化、同步、特异性蛋白标记方法打下坚实的基 础。在手性分子探针的设计及合成方面也有进展，为下一步的基于荧光的手性探针 打下基础。截至2014 年12 月10 日，已发表SCI 论文9 篇，其中影响因子5 并标署 项目资助信息的论文6 篇；另有多篇论文处于已接受但未正式出版的阶段。 课题4：免疫应答过程相关蛋白质功能的光学分子成像研究 紧密围绕研究目标，主要从以下几方面开展研究工作：1）将前期工作进行总结， 已撰写文章发表于 Proc Natl Acad Sci USA 2014, 111(43): 15432-15437，并发现 exocyst 在线虫肠细胞基底侧胞吞后物质运输过程中的重要性2 ）发现CTLA-4 在调 节不同形式免疫突触形成中起关键作用。3 ）观察了Toll 样受体受到激活的状态下， 骨髓造血微环境中间充质细胞的多项分化能力的表现，及其产生BAFF 因子的影响。 4 ）在构建对生理酸化环境具有信号应激能力近红外荧光探针方面取得了初步成果。 发表SCI 论文7 篇，其中包括PNAS 一篇，申请2 项发明专利。