水稻纹枯病菌胞外蛋白酶特性研究.pdfVIP

勉扬镊 2010,36(4)：55—59 PlantProtection 水稻纹枯病菌胞外蛋 白酶特性研究 范文艳 ， 文景芝 ， 马 建 ， 陈 瑾 ， 石园园 (1．黑龙江八一农垦大学农学院，大庆 163319；2．东北农业大学农学院，哈尔滨 150030) 摘要 植物病原茵产生蛋白水解酶被认为是病原菌侵染寄主的一个重要策略。作者对水稻纹枯病菌(Rhizoctonia solaniKtihn)产生的胞外蛋白酶的特性进行了研究。结果表明，水稻纹枯病菌产生一个分子量约为49．5ku的胞外 蛋白酶。该酶对胰蛋白酶专一性底物Benz-Phe-Val-Arg-NA有较高的活性，并能从羧基端降解Arg和Lys。胰蛋 白酶抑制剂对该酶活性有较强的抑制作用，表明该蛋白酶是一种类胰蛋白酶。在离体试验下，该蛋 白酶可以降解水 稻细胞壁蛋白并释放羟脯氨酸。SDS电泳分析显示，至少有 4个多肽被 降解，分子量 范围分别在14．4～ 2O．1、2o．1～31ku和31~43ku范围内。说明该胞外蛋白酶具有降解水稻细胞壁的能力，因此，该蛋白酶可能在水 稻纹枯病菌的致病过程中起重要作用。 关键词 水稻纹枯病菌； 细胞壁蛋 白； 胞外蛋 白酶； 致病性 中图分类号： S435．III．42；Q946．5 文献标识码 ： A DOI： 10．3969／j．issn．0529—1542．2010．04．011 Characterizati0nOfanextra．cellularproteaseproducedbVRhizoctonia solani FanWenyan ， W enJingzhi， M aJian ， ChenJin ， ShiYuanyuan (1．CollegeofAgronomy，HeilongjiangAugust—FirstLandReclamationUniversity，Daqing163319，China； 2．CollegeofAgronomy，NortheastAgriculturalUniversity，Harbin150030，China) Abstract Proteolyticenzymeshavebeen proposedasoneoftheinvasionstrategiesforplantpathogens．In this study，an extra-cellularprotease from Rhizoctonia solaniwasstudied．The enzyme hasa molecularmassof 49．5kubasedonSDS—PAGE．ItshowedhighproteolyticactivityagainstthetrypsinsubstrateBenz—Phe—Val-Arg- NA andcleavedpeptidebondsonthecarbo xylsideoflysineorarginine．Itsactivitywasstronglyinhibitedbythe trypsininhibitors．Itwasabletodegradecellwallproteinsfrom rice，releasinghydroxyproline．Degradationofat leastfourpolypeptidesof14．4—2O．1ku，20．1— 31kuand31-- 43kuwasdetectedbySDS．Theresultsug— geststhattheproteasemightplayanimpo rtantroleinthepathogenicityofR ．solanitorice． Keywords Rhizoctoniasolani； cellwallprotein； extracellularprotease； pathogenicity 水稻纹枯病是由立枯丝核菌(Rhizoctoniasola— lata分泌的天冬氨酸蛋 白酶 ；Pyrenopezizabras— KUhn)引起的一种世界性水稻病害，也是 目前水