氮胁迫条件下稻瘟病菌分泌蛋白致病性分析.pdfVIP

植物病理学报 ACTAPHYTOPATHOLOGICASINICA 39(5)：491—500(20o9) 氮胁迫条件下稻瘟病菌分泌蛋 白致病性分析 周晓罡 ，，苏 源 ，李成云。，丁玉梅 ，张绍松 ，孙茂林 ，李进斌 (云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所，昆明650223；云南省农业生物技术重点实验室，昆明650223；。云南农业大学农 业生物多样性与病虫害控制教育部重点实验室，昆明650201；云南省农业科学院农业环境资源研究所，昆明650205) 摘要：以CH-63和TH一162个致病性差异的稻瘟病菌株为材料，在缺氮培养条件下进行液体培养。经培养2d后 ，采用铵 盐沉淀及透析纯化处理获得稻瘟病菌培养滤液中的分泌蛋白。分别采用致伤接种及浸泡处理对该蛋白作用水稻植株后的 病理反应进行系统研究，结果表明经致伤接种的水稻叶片及茎杆接种斑处出现明显的坏死病斑，其病斑直径是对照的2～4 倍。浸泡处理的水稻幼根出现严重褐化，植株生长矮小，株高仅为对照的1／2。对上述稻瘟病菌株分泌蛋白进行酶解处理 后病症消失或减弱，进一步确证其为引起上述病理反应的主要因子。将该分泌蛋 白接种24个水稻单基因系，接种后 72h 根据病斑长度将24个 IRRI水稻单基因系按抗、中、感病性状分组。对稻瘟病菌菌株CH-63和TH一16的缺氮分泌蛋白致病 力强弱差异与菌丝块接种结果进行比较 ，结果表明CH-63致病力强于TH一16。 关键词：氮胁迫；稻瘟病菌；分泌蛋白；致病性 Pathogenicityanalysisofsecretory protein ofthericeblastfungusundernitrogen starvation ZHOUXiao．gang’，SUYuan。，LICheng—yun。，DINGYu—mei，，ZHANGShao—song，， SUN Mao—lin ，LIJin—bin (BiotechnologyandGermplasm Institute，YunnanAcademyofAgricultureScience，Kun— ming650223，China； KeyLaboratoryofAgriculturalBiotechnologyofYunnan，Kunming650223，China； EducationMinistry KeyLaboratoryofAgriculutralBiodiversityforPestMnaagement，Yunnan AgriculutralUniversity，Kunming650201，China； AgriculutralEnvironmentandResourcesResearchInstiutte．YunnanAcademyofAgriculutralSciences，Kunming650205，China) Abstract：ThericeblastfungalstrainsCH-63andTH一16werecultivatedinaliquidculturemedium underni— trogenstarvation．After2dofcultivation，theproteinsecretedfrom thefungalstrainswasextractedbyammo- nium sulfatesedimentationandpurifiedbydialysis．Thericeplantwasinfectedwiht secretedproteinthrough inoculationorsoakingmethod．Thenecrotic1esionwasobservedinthericeleafandstem athteinoculatedpo- sition．The1esiondiameterwas2to4 timeslargerthna thatofcontro1．Soaking treatmentresulted in severe browningriceradiclenaditwasonlyhaIfhightofthatofconrto1．W heninoculatedriceplantswererteated wiht proteaseK，htediseasesymptomsdisappearedorweakened．Thisfindingfurtherconfirmedhtathtesecre— tedproteinwashtemajorpathogenicityfactor．Twenty—fourmonogenicricelines