捻转血矛线虫H11蛋白提取及其氨肽酶活性分析.pdfVIP

第 4l卷 第 10期 东 北 农 业 大 学 学 报 41(10)：95-99 2010年 lO月 JournalofNonheastAsricultural University Oct．2010 捻转血矛线虫HI1蛋白提取及其氨肽酶活性分析 赵媛媛，韩彩霞，李晓云，宋铭忻，路义鑫 (东北农业大学动物医学学院，哈尔滨 】50o3O) 摘 要：试验对体外培养的捻转血矛线虫L4期幼虫和 自然感染的成虫的HI1天然蛋白分别进行了提取和 纯化 ，并进一步测定 了其氨基肽酶活性及酶抑制剂敏感性 ，为利用捻转血矛线虫天然抗原进行疫苗研制进行 了初步探 索。结果表明，HI1蛋 白在L4期幼虫和 自然感染成虫体内均有表达，且具有氨肽酶 M(ApM)活性和 氨肽酶A(ApA)活性，其酶活性能被 EDTA及邻二氮杂菲等哺乳动物氨肽酶抑制剂所抑制。HI1蛋白是寄生阶 段虫体的一种酶类，在对H11蛋 白进行操作时，应按照相应的酶处理方法进行 ，以防变性，影响抗原免疫效 果 。 关键词：捻转血矛线虫；氨肽酶；H11；蛋 白提取纯化 中图分类号：$852．731 文献标志码：A 文章编号：1005—9369(2010)10—0095～05 ExtractionandenzymaticactivityanalysisofaminopeptidaseofHae— monchuscontortusnative H11／ZHAOYuanyuan，HANCaixia，LIXiaoyun，SONG Mingxin，LU Yixin(College ofVeterinaryMedicine，NortheastAgriculturalUniversity，Harbin 150030，China) Abstract：ThisstudyextractedandpurifiednativeH11，andinfurthertodotheenzymaticactivity analysisandthesensitiviytexperimentofenzymeinhibitorofaminopeptidase．TheresultshowedthatH11 wasanAp．withbothApMandApAactiviyt．ItsactivitycouldbeinhibitedbyinhibitorsofmammaIianAps suchasEDTA andphenanthrolene．ItcanbeconcludedthatasenzymeintheparasiticH．conto~us，in caseofdenaturationanddegradionofimmunoprotection，strictoperationwererequired．Thisstudywilllay 收稿 日期：2010—03—25 基金项 目：黑龙江省 自然科学基金(C200929)；东北农业大学科学研究基金 作者简介：赵媛媛 (1983一)，女，硕士研究生，研究方向为寄生虫病及其分子生物学。E-mail：zhaoyuany@yeah．net 通讯作者：路义鑫，副教授，研究方向为寄生虫病学。E—mail：luyxlc@gmail．COrn Colo GirardisM，PasqualucciA，eta1．Effectsofage,bodyweight， [参 考 文 献 ] andventilatorypatternonthedifferencebetweenarterialna dend- tidalPCO~[J]．MinervaAnest