香石竹切花水孔蛋白基因DcPIP2的克隆及特征分析.pdfVIP

园 艺 学 报 2011 ，38 （11）：2199 –2208 http: // www. ahs. ac. cn Acta Horticulturae Sinica E-mail: yuanyixuebao@126.com 香石竹切花水孔蛋白基因DcPIP2 的克隆及特征 分析 李红梅，丁岳炼，黄新敏，林燕飞，邹洁云，何生根* （仲恺农业工程学院生命科学学院，广州 510225 ） 摘 要：采用 RT-PCR 和 RACE 技术从香石竹（Dianthus caryophyllus L. ）叶片中获得质膜内在蛋白 （plasma membrane intrinsic protein ，PIP ）类水孔蛋白（aquaporins，AQP ）基因的cDNA 全长序列，命名 为DcPIP2 ，GenBank 登录号为 GU989036 。该 cDNA 全序列长 983 bp，包含有 858 bp 的完整阅读框（ORF ）， 编码 285 个氨基酸，分子量约为 30.6 kD 。克隆相应的DcPIP2 基因组全长序列得知，该基因长 2 635 bp （GenBank 登录号为 JF706350 ），包含由 3 个外显子和 2 个内含子组成的编码区序列。同源性分析显示， DcPIP2 氨基酸序列与陆地棉（Gossypium hirsutum ）PIP2;3 （ACB42440 ）、麻疯树（Jatropha curcas ）AQP （ABM54183 ）和巴西橡胶树（Hevea brasiliensis ）PIP2 （ACV66986 ）氨基酸的同源性分别为 89%、88% 和 87%。利用实时荧光定量PCR 技术研究表明，DcPIP2 基因在香石竹切花的叶片、茎颈部、花瓣、雌蕊、 雄蕊和萼片中均有表达，表达量为雌蕊 花瓣 雄蕊 萼片 茎颈部 叶片。 关键词：香石竹；切花；水孔蛋白；基因克隆 中图分类号：S 681.5 文献标识码：A 文章编号：0513-353X （2011 ）11-2199-10 Cloning and Characterization of Aquaporin Gene DcPIP2 in Cut Carnations * LI Hong-mei ，DING Yue-lian ，HUANG Xin-min ，LIN Yan-fei ，ZOU Jie-yun ，and HE Sheng-gen （College of Life Sciences，Zhongkai University of Agriculture and Engineering ，Guangzhou 510225 ，China ） Abstract ：A PIP （plasma membrane intrinsic protein ）aquaporins （AQP ）gene，designated as DcPIP2 （GenBank accession number GU989036 ），was cloned from carnation （Dianthus caryophyllus ‘Master ’） leaves by RT-PCR and RACE. The full cDNA sequence of DcPIP2 is 983 bp ，containing an open reading frame （858 bp ）and encoding a protein of 285 amino acids with a predicted molecular mass of 30.6 kD. The DcPIP2 genomic DNA （2 635 bp ）（GenBank accession number JF