川芎根腐病的症状及病原鉴定.pdfVIP

维普资讯 第35卷 第4期 植 物 保 护 学 报 V01．35 No．4 2008年 8 月 ACTA PHYTOPHYLACICA SINICA Aug． 2008 川芎根腐病的症状及病原鉴定 SymptomsofrootrotonLigusticum chuanxiongand identificationofitspathogen 冯 茜 何 苗 黄 云 范巧佳 万 英 (四川农业大学农学院植物病理学系，雅安 625014) FengQian HeMiao HuangYun FanQiaojia WanYing (DepartmentofPlantPathology，SichuanAgricuhumlUniversity，Ya’an 625014，SichuanProvince，China) 川I芎LigusticumchuanxiongHort为四川地道中 连市宝生物工程有限公司)、2xTaqPCRMasterMix 药材_lI2J，其产量 占全国川I芎商品量的90％以上。 12．5“L(成都博瑞克生物技术有限公司)、灭菌去离 随川芎种植面积的扩大，川I芎病害问题 日益突出， 子水9．5 “L。反应条件为：94℃预变性 3min，然后 其中以根腐病的危害最大，发病率通常为25％～ 94℃90S，60℃退火60S，72℃延伸90S，35次循 38％，严重时达50％～70％，给川芎生产造成严重损 环，72℃延伸 10min。PCR产物纯化及测序由大连 失 J。本研究对川芎根腐病的症状进行系统观察， 市宝生物工程有限公司完成。将菌株的rDNA—ITS 利用形态学，并结合 rDNA—ITS序列测定，对该病的 序列在 NCBI网站上用 DNAMAN软件与 GenBank 病原菌进行了鉴定。 中已知种的rDNA进行序列比对和同源性分析。 1材料与方法 2 结果与分析 1．1川芎根腐病症状 2．1 症状 2006年 10月至2007年4月，在四川省都江堰 川芎根腐病在川芎的整个生长期内均可发生。 市川芎种植基地定期观察记载川芎根腐病植株地上 发病初期，地上部从外围的叶片开始褪色变黄，并逐 部和根部的症状 。 渐向心叶扩展。地下块茎的病部初呈褐色至红褐 1．2病原菌的分离与回接 色，水渍状，随病情发展，病株叶尖、叶缘焦枯。感病 采集 田问具典型症状的病根，用组织分离法分 块茎髓部变黑，后期块茎内部腐烂，呈黄褐色浆糊 离，在PDA上25℃获病原菌纯培养物。 状，有臭味，最后病株停止生长、桔死(图1)。 用70％酒精表面消毒健株根，无菌水清洗，针 2．2 病原菌的分离与回接 刺伤根部后于孢子悬浮液 (10x10倍镜下50～100 分离菌株在PDA平板上2天后出现 白色至浅 个孢子)中浸 30min，移栽于灭菌土中。以不接菌 灰色菌丝，3天后开始产孢，菌丝有隔、絮状，菌落 为对照，2周后对根腐部再分离。 背面呈淡紫色。分离菌株回接 16天后发病，症状与 1．3病原菌鉴定 田问症状相同，而对照不发病。从发病的部位进行 将分离菌于 PDA平板上培养4天后，参照 再分离获相同病菌。证明该分离菌是川芎根腐病的 Booth 的镰刀菌分类标准进行形态学