第十七章_革兰性菌.ppt

格兰阴性球菌 奈瑟菌属（Neisseria）布兰汉菌属（Branhamella） 概述 “伯杰鉴定细菌学手册”第9版 将奈瑟菌属和布兰汉菌属归于群4，将奈瑟菌属、莫拉菌属、金氏菌属和不动杆菌属都归于奈瑟菌科 奈瑟菌属中的淋病奈瑟菌（N.gonorrhoeae）、脑膜炎奈瑟菌（N.meningitidis）以及莫拉菌属中的卡他莫拉菌（M.catarrhalis）是主要的致病菌。 目前对卡他莫拉菌是归属尚未定论 一、分类 脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌对人致病 寄生在人体内鼻咽腔的腐生菌 解乳糖奈瑟菌、干燥奈瑟菌、微黄奈瑟菌、粘液奈瑟菌、浅黄奈瑟菌、灰色奈瑟菌、延长奈瑟菌、去氮奈瑟菌和多糖奈瑟菌 1．形态 革兰阴性双球菌 直径0.6~1.5μm 形似双肾或咖啡豆样，凹面相对 无动力，无芽胞， 某些菌种形成荚膜 2．培养特性 需在培养基中添加羊血、兔血或血清，对脂肪酸敏感，在培养基中需加入可溶性淀粉。 需氧生长，初次分离需5%~7%CO2和高湿度 最适生长温度为35~37℃，低于30℃不生长 血琼脂平板或巧克力琼脂平板上呈光滑、湿润、透明或半透明、直径1~2mm的不溶血、圆形、灰兰色菌落 卵黄琼脂平板上为无色、光滑、半透明、边缘整齐、湿润奶油状菌落 在液体培养基中呈轻度或中度混浊生长，无菌膜 脑膜炎奈瑟菌于孵育24h后在培养基上发生自溶 3．生化特性 氧化酶阳性，触酶阳性（除延长奈瑟菌外） 分解葡萄糖和麦芽糖，产酸不产气 对糖分解能力、硝酸盐还原能力和DNA合成酶不同，常作为菌种间的鉴别依据 奈瑟菌属DNA中G+Cmol%为46~54 抗原构造、抵抗力 4．抵抗力 对寒冷、干燥和热的抵抗力弱，对化学消毒剂敏感 对青霉素敏感 但近年来由质粒介导的β内酰胺酶所致的耐 药在淋病奈瑟菌中产生较多 所致疾病 流行性脑脊髓膜炎（人类是唯一的易感宿主) 冬末春初，多为学龄儿童、青少年 感染后多为隐性感染，早期，有上呼吸道症状，少数可发展为菌血症或败血症，进而累及脑、脊髓膜，形成化脓性脑膜炎 可出现严重的临床症状如发热、头痛、脑膜刺激 症阳性、甚至休克和DIC等；菌血症和细菌的损 伤作用使约半数患者出现皮下瘀斑 主要侵犯蛛网膜 免疫性 6月～2岁年龄组婴儿免疫力最低，是易感人群 病后可获得体液免疫 脑膜炎奈瑟菌 标本采集 无菌方法抽取脑脊液、关节液、血液、瘀点穿刺液等标本 采集后立即送往实验室 用血平板进行床边接种后置35℃孵育 血液标本接种在血液培养瓶中置35℃孵育 标本运送时需要35℃保温 脑膜炎奈瑟菌检验程序 标本直接检查 直接涂片检查 脑脊液直接或经离心后取沉淀涂片 皮肤瘀点渗出液涂片 革兰染色后显微镜下见白细胞内外的革兰阴性双球菌，可报告“检出革兰阴性双球菌，疑似脑膜炎奈瑟菌”。有助于流行性脑脊髓膜炎早期诊断 抗原检查 通常用胶乳凝集试验和其他凝集试验 包括A、C、Y、W125血清型的多价抗体和血清型B抗体 检测结果应结合涂片和培养结果，抗原检测阳性结果可作出快速、推测性诊断 分离培养鉴定 脑脊液标本 接种在巧克力琼脂或羊血琼脂平板 咽拭子或鼻咽拭子 接种在选择性培养基上如改良的Thayer-Martin(MTM)、GC-Lect、New York City(NCY)等培养基 血液标本 经增菌培养基增菌培养后，移种至巧克力琼脂或羊血琼脂平板上 置5%~7%CO2 35℃孵育，每隔24h观察平板 鉴定 初步确定为奈瑟菌属 直径1~2mm，灰褐色、光滑、半透明、稍扁的菌落 涂片革兰染色见阴性双球菌 氧化酶试验阳性 进一步进行葡萄糖和麦芽糖发酵试验阳性、其他糖 类发酵阴性可确定为脑膜炎奈瑟菌 用分型血清确定血清型别 平板上没有发现菌落需继续观察72h后无菌生长可报告为阴性 防治原则 综合性预防措施 隔离病人、检查带菌者、预防性投药，室内通风 流脑疫苗： 6个月-2岁接种两次，间隔1月 A群脑膜炎球菌多糖抗原。制备疫苗 青霉素、磺胺大剂量治疗 二、淋病奈瑟菌N. gonorrhoeae 4.快速诊断 卡他莫拉菌培养及鉴定 在血液琼脂或巧克力琼脂平板上生长良好 35℃ 24h孵育后菌落直径1~3mm，灰白色、光滑，用接 种环推菌落可将整个菌落在平板表面移动 氧化酶和触酶阳性 不发酵葡萄糖和其它糖类产酸 大多数菌株还原硝酸盐和产生DNase。 三丁酸甘油酯水解（丁酸酯酶）试验阳性可与奈瑟菌属鉴别 可产生诱导型β内酰胺酶 奈瑟菌属和卡他布兰汉菌的鉴定 思考题 简述葡萄球菌的生物学特性 简述链球菌的生物学特性 金黄色葡萄球菌和乙型溶血性链球菌引起化脓性炎症的特点有何不同，为什么?