第十一章 采用玉米Ubi-1启动子获得低拷贝转基因玉米植株.pdfVIP

卷 期 生 物 工 程 学 报 ! # %’ (! ) ( # 年 月 !$ # !#$%% ’()*$+, (- .#(/%0$(,(12 *+,-+./ !$ !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 采用玉米!#$% 启动子获得低拷贝转基因玉米植株 徐子勤 龚莉桂 黄 萱 张永彦 高丽美 （西北大学生物技术陕西省重点实验室，西安 B#23 ） 摘 要 通过基因枪粒子轰击和草丁膦（ ）选择获得可育的玉米转基因植株，并分析了外源基因在转化体中的 CC6 拷贝数与启动子之间的关系。用玉米DE;1# 启动子驱动外源基因，玉米转化体中外源基因的拷贝数较低；可能的原 因为DE;1# 启动子通过与其内部同源序列发生重组而被定点整合进玉米基因组，共转化的两种质粒F)G 在整合至 玉米染色体F)G 之前已重构成为一个整体。结果显示使用某一植物自身基因的启动子可以降低外源基因在该物 种转基因个体中的拷贝数，进而避免基因沉默现象的发生。目前已得到第二代转基因玉米种子。 关键词 玉米DE;1# 启动子，基因枪，转基因植物，外源基因，低拷贝数 中图分类号 文献标识码 文章编号 （ ） HB8 G #102# !$ #1#!12 直接导入方法（包括基因枪方法）经常导致被转移 处理过夜，第 天分离未成熟胚，以促进培养过程中胚性 F)G $ N ! 基因在转化体中以多个拷贝形式存在，其中一些拷贝会发生 愈伤组织的形成。将约 @4 S #:: 大小的未成熟胚接种至 重排。多拷贝的外源基因是产生基因沉默现象（指外源基因 含 琼脂糖、 蔗糖、 ， 和 水解酪蛋 @8P ! P !:TU V ! $1F 4:TU V ［］ B 在转基因植株后代中的表达受到抑制或完全失去表达能力） 白的 培养基 上，胚轴向下、盾片组织朝上于 、黑暗 )2 !2N 的主要原因。基因沉默一般由顺式失活（通常由F)G 甲基 条件预培养# 周。随时去除长大的胚芽鞘等胚轴组织。 化引起）、反式失活和被转移基因的不同拷贝之间或被转移 %’ 质粒构建和共转化组合 ［ ］ # I ! 使用了 种质粒，由德国汉堡大学普通植物学研究所