第一章 基因工程概论-课件.pptVIP

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* * Placenta:胎盘 Uternie:子宫 * * Genes responsible for particular traits or disease susceptibility are chosen and extracted. Next they are injected into fertilized mouse eggs. Embryos are implanted in the uterus of a surrogate mother. The selected genes will be expressed by some of the offspring. Since the first gene transfers into mice were successfully executed in 1980, transgenic mice have allowed researchers to observe experimentally what happens to an entire organism during the progression of a disease. Transgenic mice have become models for studying human diseases and their treatments. 改变传统农业概念:人和植物“杂交” 让植物生产人体蛋白质  抗体烟草  血清白蛋白马铃薯  脑啡呔油菜 生产促性腺绒毛激素的矮牵牛花  我们吃的每一口食物都曾通过遗传工程改造过。 - 转基因大豆: 55% 种植大豆 (2000) - 豆类食品: 作为食品添加剂溜上我们的餐桌。 转基因抗农药品种 一品红 让地上长塑料! 植物合成可降解塑料! Production of speciality chemicals Enkephalins Fatty acids Human serum albumin Sugar monomers Sugar thermoplastic polymers Vaccines (e.g. hepatitis) 利用微生物的废液处理厂 基因工程课程内容 5 2 3 4 1 6 7 基因工程概论 分子克隆单元操作 大肠杆菌基因工程 酵母基因工程 动物基因工程 植物基因工程 蛋白质工程、途径工程(自学) 2)如何构建? 1)如何设计? * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 4.“操纵子”学说揭示了基因表达和调控的机制。 5、破译了全部的遗传密码 基因工程的理论依据 相同的遗传物质基础(DNA) 相同的遗传机制(DNA的复制) 相同的基因表达法则(中心法则) 通用的遗传密码(64个密码子) 多肽与基因之间存在对应关系 基因可重组或转移(天然重组、转座) 1.核酸内切酶和DNA连接酶的发现 ——为DNA的体外重组准备了基本的“工具” Smith发现了第一个限制性核酸内切酶(restrictien endonuclease,RE) HindII。分子手术刀:特异性切割 Boyer发现了第一个用于基因工程的内切酶EcoRI Khorana发现了T4 DNA连接酶(Ligase), 粘合剂:能将DNA片段连接在一起 (二)基因工程诞生的技术基础 Boyer发现的EcoRI 2.DNA载体系统的发现 目的基因、 DNA片段不能复制,也易破坏。必须连到具有复制能力的载体(vector) DNA分子上。 研究表明质粒、噬菌体和病毒是理想的载体分子。 大肠杆菌的质粒首先用于载体。 3、大肠杆菌DNA转化体系建立 1970年发现氯化钙处理过的细胞易于吸收接纳外源DNA; 1972年Cohen C报道,质粒DNA也能被大肠杆菌吸收。 而后发现经过改造的质粒、噬菌体和病毒都可以携带目的DNA片段和基因,经过转化大肠杆菌,建立该基因的无性繁殖系。 4、DNA分离、纯化技术的建立 凝胶电泳:Agarose gel, PAGE 可以分离纯化DNA片段,并检测连接情况 (三)基因工程的诞生 1980年Nobel化学奖 1972年斯坦福大学的Paul Berg小组完成了首次体外重组实验: Berg的开创性实验 将SV40的DNA片段与?噬菌体的DNA片段连接起来。 DNA重组(体外):不同的DNA分子间发生共价连接形成重组DNA 分子。 重组

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