急性白血病9号染色体微卫星复制错误的研究论文.docVIP

　　急性白血病9号染色体微卫星复制错误的研究论文 【摘要】 目的 研究急性白血病（AL）9号染色体微卫星复制错误（RER)现象，探讨微卫星在白血病发病过程中的作用和用于检测染色体微小缺失的意义。方法 选取AL病人53例，其中急性髓细胞白血病(AML)33例，急性淋巴细胞白血病(ALL)20例。在9号染色体共选择5个微卫星位点，对骨髓细胞DNA及作为对照的自身口腔黏膜细胞DNA进行多重PCR扩增，通过聚丙烯酰胺凝胶电泳、银染，观察微卫星不稳定性(MSI)和杂合性缺失(LOH)的发生情况。结果 53例AL中，共36例发生了至少1个位点的MSI.freelicrosatellite replication error (RER) in chromosome 9 during the pathogenesis of acute leukemia and to investigate the significance of MSI and LOH in detecting the minima deletions of chromosome.Methods Fiftythree cases of acute leukemia yeloblastic leukemia (AML) and 20 cases of acute lymphocytic leukemia (ALL). MSI and LOH in acute leukemia arroicrosatellites on chromosome 9 by multiPCR amplification, gel electrophoresis and argentine dye. Normal oral mucosa cells served as controls. Results Thirtysix cases of acute leukemia demonstrated MSI at one or more loci. In AML, 15 cases shoicrosatellite icrosatellites.Conclusion The high frequencies of RER+ in acute leukemia indicate that the pathogenesis and progress of acute leukemia is related to the extensive MSI; AML shoay be some gene alterations in AML. The microsatellite technology is a neethod to investigate acute leukemia. ［KEY icrosatellite instability; Loss of heterozygosity 微卫星是广泛存在于基因组中简单串联式的核苷酸重复序列，约占基因组的5%1。微卫星标记属于高信息量的遗传标志，表现为长度的多态性，高度的杂合性，自身突变率低，符合孟德尔遗传规律。因此，微卫星标记已被广泛用于遗传病连锁分析、肿瘤研究等领域。微卫星不稳定性是由于复制错误（RER）引起的简单重复序列的增加（MSI）或缺失（LOH）。研究表明，多种恶性肿瘤可表现出MSI及LOH。因此，对微卫星进行检测以确定染色体的细微改变，进一步寻找和定位与肿瘤发生发展相关基因成为研究肿瘤发生机制的重要方法。大量研究表明，9号染色体短臂，特别是9p2122，在许多实体肿瘤中均可检出较高的LOH，提示9p2122可能存在一组抑癌基因或一个多效性基因2～6。9号染色体长臂9q34是白血病常见的染色体易位断裂点，该部位的基因改变可能与白血病的发生有关7,8。本研究在9号染色体9p2122和9q34上各选取3个和2个微卫星位点做进一步研究，以探讨微卫星复制错误对急性白血病发病的作用，并确定是否在此区域存在候选的抑癌基因。 1 材料和方法 1.1 标本来源 1.1.1 病例组 2002年9月～2004年9月，共收集青岛大学医学院附属医院急性白血病病人标本53例，其中急性髓细胞白血病(AML) 33例，急性淋巴细胞白血病(ALL)20例。 53例病人中男31例，女22例；年龄12～78岁,中位年龄36岁。FAB分型根据《血液病诊断和治疗标准》9。 1.1.2 对照组 7例标本均来自青岛大学医学院附属医院门诊健康查体者，其中男3例，女4例，年龄17～44岁，中位年龄32岁。 1.1.3 良性血液病组 15例良性血液病标本均来自青岛大学医学院附属医院住院病人，包括缺铁性贫血7例，巨幼细胞性贫血4例，血小板减少性紫癜4