植物组织培养医.docVIP

植物组织培养研究性学习报告 目的：掌握基本原理掌握基本概念了解开展组织培养工作的基本设施掌握植物组织培养基本的操作技术掌握植物组织培养在植物快繁、脱毒等方面的应用。 内容：(1) 掌握组织培养的概念和类型；(2) 掌握组织培养的特点；?(3) 了解组织培养发展史；?(4) 初步掌握组织培养在农业实践上的应用。 植物组织培养是指用无菌方法使植物体的离体器官、组织和细胞在人为提供的条件下生长和发育的所有培养技术的总称，也称之为离体培养（或试管培养。 器官：根、茎、叶、花、果实、种子 组织：花药、胚珠、胚、胚乳、形成层等 植物组织培养特点：①培养条件可以人为控制②生长周期短，繁殖率高③管理方便，利于工厂化生产和自动化控制 植物组织培养的理论基础—细胞全能性 细胞全能性：植物体的每一个具有完整细胞核的细胞都具有该物种全部遗传的物质，在一定条件下具有发育成完整植物体的潜在能力 植物细胞全能性的表达：一个细胞一旦沿着某一条特定的途径分化发育后，一般不会再回复到未分化状态，但在组织培养条件下，可能发生脱分化和再分化。 脱分化：将已分化的不分裂的静止细胞，放在培养基上培养后，细胞重新进入分裂状态。一个成熟的细胞转变为分生状态的过程叫脱分化 再分化:经脱分化的组织或细胞在一定的培养条件下可转变为各种不同的细胞类型，形成完整植株的过程。 植物组织培养过程：离体的植物器官、组织、细胞-脱分化-愈伤组织-再分化-根芽-再生植株 植物的生活史：受精卵-早期胚胎发育-合子胚-分化-组织-形成-器官-构成-植物体 植物组织培养过程：外植体-脱分化-愈伤组织-再分化-组织-形成-器官-构成-植物体 胚性细胞：保持着未分化状态和旺盛的分裂能力的一类细胞，这类细胞彼此相似、细胞核大、细胞质浓稠、细胞间无间隙，主要分布于胚及各种顶端分生组织中。 分化：细胞在形态、结构和功能上发生永久性的适度变化的过程。 脱分化：成熟的细胞转变为分生状态，进而分裂形成无分化的细胞团，即形成愈伤组织的过程。 再分化：脱分化后的细胞再次分裂、分化并形成不同组织、进而构成器官和植株的过程 再分化过程的两种方式：（1）器官发生方式：外植体-脱分化-愈伤组织-再分化-不定芽-转管-不定根-再生植株（2）无性胚胎（体细胞胚）方式：外植体-脱分化-愈伤组织-再分化-胚状体-再生植株 组织培养植株再生的途径：1）、体细胞胚胎发生途径（胚状体发生途径） ： 是指在组织培养中起源于一个非合子细胞，经过胚胎发生和胚胎发育过程（经过原胚、球形胚、心形胚、鱼雷胚和子叶胚5个时期），形成具有双极性的胚状结构，而发育成再生植株的途径。 胚状体发生途径2）、器官发生途径：由愈伤组织或外植体诱导形成不定根或不定芽，再获得再生植株的方法 外植体：由活体（in vivo)植物体上切取下来的，用于组织培养的各种接种材料。包括各种器官、组织、细胞或原生质体等。 愈伤组织：在人工培养基上由外植体上形成的一团无序生长状态的薄壁细胞。 生长素：生长素的作用是诱导愈伤组织的形成常用的有：2，4-二氯苯乙酸（2，4-D）萘乙酸（NAA），吲哚乙酸（IAA），和吲哚丁酸（IBA） 作用强弱大小：（2，4-D） （NAA） （IBA） （IAA） 细胞分裂素常见的有：2-异 烯腺嘌呤(2iP）,玉米素（ZT），6-苄基氨基嘌呤（BA），和激动素（KT）。 它们的作用强弱：(2iP） （ZT） （BA） （KT） 其他：赤霉素GA3是天然产物，能促进分化芽的生长。其他的生长调节剂：如脱落酸（ABA），乙烯利（EDDP）等在植物组织培养中也有一定作用 植物组织培养的类型1.愈伤组织培养（最为常见的组织培养）2.器 官 培 养（胚、胚乳、珠心、子房、根、茎、叶、花和幼果的部分组织的培养）3.细胞培养4.原生质体培养（悬浮细胞培养；单细胞培养） 根据培养器官的不同：叶培养、根培养、花药培养、胚珠培养、茎尖培养等 根据培养方式：固体培养、液体培养 固体培养：将培养物放在含有琼脂等固化剂的培养基表面进行培养。 液体培养：将培养物放在未加固化剂的培养基内培养，一般需进行震荡，又称液体震荡培养。 固体培养、液体培养的特点：(1)固体培养法：是最常用的方法。该方法简单，易行，但养分分布不均，生长速度不均衡，并常有褐化中毒现象发生。(2)液体培养法：由于液体中氧气含量较少，常用振动培养的方法以确保氧气的供给往复式摇床或旋转式摇床进行培养，速度一般为50-200r／min，这种定期浸没的方法，既能使培养基均一，又能保证氧气的供给。 根据培养物量的多少：大量培养、微量培养。 根据培养过程中是否需光：光培养、暗培养 根据培养方法的不同：平板培养、微室培养、悬浮培养等 按培养过程分为:初代培养和继代培养初代培养：指外植体的最初培养。继代培养：将初代