血中铅的酸脱蛋白-石墨炉原子吸收光谱法1原理.PDF

血中铅的酸脱蛋白-石墨炉原子吸收光谱法 1 原理 血液样品用硝酸溶液进行萃取，在283.3nm波长下，用石墨炉原子吸收光谱法测定铅含量。 2 仪器 2.1 容量瓶：10mL。 2.2 具塞聚乙烯离心管：1.5mL。 2.3 旋涡混合器。 2.4 离心机：转速大于10000r/min。 2.5 微量移液器：量程分别为20-200µL、100-1000µL 。 2.6 原子吸收光谱仪：具石墨炉、塞曼装置。 3 试剂 3.1 去离子水。 3.2 硝酸，ρ20= 1.42g/mL ，优级纯。 3.3 硝酸溶液，1% （v/v ）。 3.4 硝酸溶液，5% （v/v ）。 3.5 硝酸溶液，0.2% （v/v ）。 3.6 牛血，肝素抗凝，-20 ℃保存，用时放至室温摇匀。也可采用低本底人血、羊血等。本底铅含 量应低于50µg/L 。 3.7 标准储备溶液：采用国家认可的铅单元素标准溶液。 4 样品的采集、运输和保存 依次用0.2%硝酸溶液、酒精清洁取血部位皮肤，血液样品的采集应大于2mL，并立即摇匀， 防止血液中有凝块形成。必要时采集双份样品，一份作为备份样品。随机抽取与样品采集同批号 的采血用品2份，作为样品空白。将采集后的样品和样品空白置于清洁容器中冷藏运输。 样品在-20 ℃下可保存半年。 5 分析步骤 5.1 仪器操作参考条件： 干 燥 80~ 150℃，55s 灰 化 300~350℃，20s 原子化 1600℃，5s，停气 清 除 2400 ℃，3s 5.2 血铅标准工作曲线系列的配制： 将铅单元素标准溶液用1%硝酸溶液稀释成50.0µg/mL铅标准应用液，再用1%硝酸溶液配成浓 度为0µg/mL、1.25µg/mL 、2.50µg/mL、5.00µg/mL、10.00µg/mL、12.50µg/mL铅标准溶液系列。 取6只10mL容量瓶，编号为1~6号。分别加入0.40mL浓度为0µg/mL~12.50µg/mL的铅标准溶液系 列，再用牛血定容至刻度，即配制成浓度为0µg/L、50µg/L、100µg/L、200µg/L、400µg/L、500µg/L 的血铅工作曲线标准溶液系列。具体见表1。 表1 血铅工作曲线标准系列配置 容量瓶编号 1 2 3 4 5 6 铅标准溶液（µg/mL ） 0 1.25 2.50 5.00 10.00 12.50 取铅标准溶液（mL ） 0.40 0.40 0.40 0.40 0.40 0.40 取牛血（mL ） 9.60 9.60 9.60 9.60 9.60 9.60 本底值 本底值 本底值 本底值 本底值 血中铅标准溶（µg/L ） 0 +50 + 100 +200 +400 +500 分别取0.15mL血铅标准溶液工作曲线系列于具塞聚乙烯离心管内，各管加入0.60mL 5%硝酸 溶液，立即盖好盖子，强力振摇，然后在旋涡混合器上振摇5min，以10000rpm离心5min，上清液 供测定。参照仪器操作参考条件，将原子吸收光谱仪调整到最佳测定状态，取15μL上清液进样， 测定各标准系列。2~6号的吸光度值减去1号的吸光度值后，对相应的铅浓度（µg/L）绘制工作曲 线或计算线性回归方程。 5.3 样品处理和测定： 将冷冻血样取出，恢复到实验室温度。充分振摇混匀，取出0.15mL，置于1.5mL具塞聚乙烯 离心管内，其余处理步骤同上。用测定标准系列的操作条件测定样品及样品空白溶液，空白测定 结果应小于检出限。当检测结果大于检出限时，表明样品在采集、运输和存储过程中受到污染， 批量样品应作废。测得的吸光度值由工作曲线或回归方程计算铅的浓度（µg/L）。 用采血针抽取2.0mL水置于采血管中，震荡，其余处理步骤同上。 6 计算 按式（1）计算血样中铅的浓度：