中药天年饮对衰老大鼠肝功能的保护作用论文.docVIP

　　中药天年饮对衰老大鼠肝功能的保护作用论文 杨振军 谢红林 李皓岩 薛景凤 【摘要】 目的观察中药天年饮对衰老大鼠肝功能的保护作用。方法40只SD大鼠随机分为4组：正常组、衰老模型组、天年饮用药组和阴性对照组，每组10只；D-半乳糖连续腹腔注射（200 mg·kg-1·d-1，连续40 d）制作亚急性衰老的大鼠模型，并给予天年饮灌胃（30 d）。分别采用黄嘌呤氧化酶法和硫代巴比妥酸法检测大鼠血清SOD活性和MDA含量， IFCC连续监测法检测大鼠血清ALT，AST，ALP和γ-GT等各项肝功能指标。结果天年饮可明显提高衰老大鼠血清的SOD活性、降低MDA含量，天年饮用药组与衰老模型组比较差异显著（P＜0.05或P＜0.01）；天年饮可明显降低衰老大鼠血清ALT、AST、ALP和γ-GT含量.freelg·kg-1·d-1给药。天年饮由何首乌、肉苁蓉、丹参、淫羊藿、怀牛膝、茯苓６味中药组成，经熬制后每毫升含生药1.5 g灌胃。检测血清中超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）含量的试剂盒由南京建成生物工程研究所提供；检测血清中丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)的试剂盒购自北京首都医科大学临床医疗科技中心。 1.2 动物的选择及分组 成年雌性SD大鼠40只，体重180～250 g，由河北医科大学实验动物学部提供。将40只大鼠随机分为4组：正常组、模型组、天年饮用药组和阴性对照组，每组均为10只。其中模型组、用药组、阴性对照组大鼠均采用D-半乳糖连续腹腔注射（1次/d，共40 d）制作亚急性衰老的大鼠模型，模型组大鼠造模成功后不再做任何处理；天年饮用药组大鼠于造模成功后每天用天年饮灌胃，共30 d；阴性对照组于造模成功后每天用同等剂量的生理盐水灌胃，时间同用药组大鼠。 1.3 指标检测 大鼠经内眦取血，2 000 r/min离心10 min， 取上清液，-20℃冰箱保存待测。 1.3.1 SOD活性及MDA含量分别采用黄嘌呤氧化酶法和硫代巴比妥酸法检测大鼠血清SOD活性和MDA含量。 1.3.2 肝功能应用HITACHI 717全自动生化分析仪、IFCC连续监测法检测大鼠血清中的ALP和 AST。 1.4 统计学处理 采用SPSS11.0统计软件以方差分析进行统计分析，P＜0.05为差异显著性的标准。 2 结果 2.1 大鼠血清SOD活性和MDA含量 见表1。 与正常组大鼠比较，模型组大鼠血清SOD活性明显降低（P＜0.05）、MDA含量明显升高（P＜0.01）；与模型组大鼠比较天年饮用药组大鼠血清SOD活性明显升高（P＜0.05）、MDA含量明显降低（P＜0.01），差异显著。 表1 大鼠血清SOD活性和MDA含量（略） 与正常组比较，#P＜0.05，*P＜0.01；与模型组比较，##P＜0.05，**P＜0.01；n=10 2.2 各组大鼠的肝功能 见表2。 衰老模型组大鼠各项肝功能指标均明显高于正常组大鼠（P＜0.01）；天年饮可明显降低模型组大鼠各项肝功能指标，与模型组比较差异显著（P＜0.05或P＜0.01）。 表2 各组大鼠的肝功能（略） 与正常组比较，*P＜0.01；与模型组比较，**P＜0.05，# P＜0.01；n=10 3 讨论 《灵枢·天年》中详细描述了人衰老过程中五脏功能衰退的时间顺序：“五十岁，肝气始衰，肝叶始薄，胆汁始灭，目始不明。六十岁，气始衰，苦忧悲，血气懈惰，故好卧。七十岁，脾气虚皮肤枯……”其中肝在五脏中最先出现衰老征象。天年饮方由刘河间《宣明论方》何首乌丸加味而成，何首乌丸本由何首乌、肉苁蓉、怀牛膝组成，能填精补髓、乌发延年；于此基础上加淫羊藿补肾壮阳以强筋骨，丹参活血化淤以通心脉，茯苓健脾利湿以宁心神。诸药相配通调心脾肝肾四脏，而以肾为主，气机条达，血脉流通，衰从何由。 衰老是生命过程中正常的生理现象，自1956年英国学者Haman提出自由基学说以来，大量实验表明自由基及其引起的脂质过氧化反应是引起生物衰老的主要原因。在正常情况下机体内存在包括SOD、谷胱甘肽过氧化物酶等在内的抗氧化物质，使体内活性氧（ROS）的产生与消除处于平衡状态。有研究表明，SOD活性下降与衰老密切相关，它的活性降低被认为是衰老的一项重要指标［4］；MDA是自由基损伤不饱和脂肪酸生成的脂类过氧化分解产物，其含量升高可间接证明自由基水平增高和反应机体活性氧损伤效应［5］。随着年龄的增长，机体抗氧化防御体系活性降低，清除自由基能力下降，ROS产生过多，过量的ROS可以攻击位于线粒体内膜上的脂类、蛋白质和mtDNA，影响线粒体的功能，导致细胞受损、衰老和疾病的发生［6］。本研究发现，中药天年饮可明显提高衰老大鼠血清SOD活性、降低MDA含量