呼伦贝尔北方药业抗生素生产知识问答(发酵)概要.docVIP

抗生素生产知识问答 （内部资料） 第一册 发酵部分 1、抗生素工业的建立始于何时？ 抗生素工业的建立始于1943年，在美国首次开始工业化生产青霉素，时值第二次世界大战期间，生产的青霉素仅供军需，生产属于保密，到1944年，在青霉素生产的发酵工艺中有一次很大的改革，试验成功深层培养法，找到了适宜深层发酵的菌种，产量大大增加，青霉素才普及于民用。 2、抗生素剂量的表示方法是什么？ 抗生素的剂量用效价单位来表示，简称单位，以u代表，分为发酵液的u/ml和纯品结晶粉的u/mg两种表示方法。抗生素的效价单位是以其抗菌活性来表示的，一个青霉素效价单位表示能完全抑制50毫升肉汤培养基中生长的金黄色葡萄球菌的最小剂量。1毫克青霉素G钠盐的纯品能完全抑制83350毫升肉汤中的葡萄球菌，因此，青霉素成品的毫克单位是1667。一个链霉素效价单位为能完全抑制1毫升肉汤培养基中生长的大肠杆菌的最小剂量，1毫克链霉素碱能完全抑制1000毫升肉汤培养基中的大肠杆菌，因此，链霉素碱成品的毫克单位是1000。同理，土霉素、红霉素、卡那霉素、万古霉素、新霉素等抗生素的游离碱均以1毫克作1000单位计。氯霉素、四环素及金霉素的盐酸盐也以1毫克作1000单位计。各种抗生素盐类的效价应根据其分子量换算。在实际应用上，药用抗生素的最低毫克单位是根据医疗上的要求与生产技术的水平由药典来规定的。 3、抗生素发酵的定义是什么？ 发酵二字在不同情况下有不同的含义。从广义讲，发酵是至微生物籍酶的作用而致有机基质发生化学变化的物质代谢过程。在生化学中，发酵是指代谢过程中的无氧呼吸过程，如酒精发酵、乳酸发酵和丙酮、丁醇发酵。以抗生素生产而言，发酵酒是微生物活细胞在一定培养条件下，分介利用各类有机物质生物合成抗生素的过程。 4、抗生素发酵的特点是什么？ 微生物的发育过程分为两个阶段，一是大量繁殖菌体，二是菌体生长减慢，菌体细胞内大量合成各种代谢产物。因此抗生素的发酵过程也分为两个时期，第一时期代谢旺盛，微生物分介利用培养基中的营养物质来合成细胞物质，从而大量繁殖菌丝体，这时初级代谢油管酶活力高而抗生素合成有关酶受抑制，因为不合成抗生素或合成抗生素的量极少。抗生素发酵的第二个时期代谢活动减弱，初级代谢有关酶受抑制，菌丝生长大大减慢，仅维持菌丝量的平衡，抗生素合成有关酶的抑制被介除，大量合成抗生素。 5、如何划分抗生素发酵过程的菌丝生长期和抗生素合成期? 发酵过程中的菌丝生长期是在接种后到菌丝体长浓为止，约在20-30小时之间，菌丝体浓度约40%—50%。菌丝生长期要求尽量缩短，以使有更多的时间合成抗生素，菌丝体长浓厚一直到放罐前的平衡器为抗生素合成期，菌丝体的比生长速率极低，生长的菌体仅足以弥补衰老死亡的菌体，菌体浓度相对平衡，维持在40%—50%菌浓。抗生素合成期要求尽量延长，使抗生素产量不断积累增多。 7、发酵的培养基组成怎么样才能满足菌丝生长期和抗生素合成期对营养的需求？ 菌丝生长需要利用氮源和碳源、无机盐等营养物质，为使菌丝体在短时间内迅速大量地生长，发酵培养基中应提供能被迅速利用的氮源和碳源。葡萄糖属于迅速利用碳源，对于淀粉酶活力高的菌种，糊精也可被迅速利用。液化淀粉中含有一部分糊精、麦芽糖和葡萄糖可供前期长菌丝用。玉米浆、硫酸铵、尿素等都属于迅速利用氮源。供前期菌丝生长用的迅速利用碳源、氮源加量不宜过多，以免菌丝过量生长。葡萄糖的加量要视菌种特性而定，一般在1%左右，菌丝生长慢的放线菌可适当增量，但不宜超过5%。玉米浆、硫酸铵等的总量控制在0.2%—1.5%。发酵培养基还应有足够量的缓慢利用氮源、碳源供抗生素合成期逐步分介和利用。乳糖，淀粉等属于缓慢利用的碳源，黄豆饼粉、花生饼粉都是缓慢利用的氮源，加量根据菌种的利用能力、发酵单位的高度、周期的长短而不同。缓慢利用碳、氮源的特点是可由微生物自我控制逐步分介利用，避免分介代谢物过量积累而引起代谢的反馈调节作用，抑制抗生素的合成，发酵培养基中的磷细胞物质，因此加量不能太多，一般控制在初期，即培养10小时前培养液含有一定的磷量，菌丝长浓后，培养液只须维持极低的磷量，以免引起对初级代谢的活化。此外，培养基还需要少量供应菌体生长和抗生素合成所必需的矿物语速和前提物质。 8、碳源的作用是什么？ 碳源是供微生物合成各类细胞物质和代谢产物的碳架。抗生素发酵使用各种糖类作碳源，糖的氧化又可产生大量的生物能，供合成各种代谢产物时使用。 9、不同品种抗生素发酵使用到糖类为什么不同？ 不同品种的抗生素利用不同的微生物进行生产。不同的微生物因其酶系统不同，故而能李彤糖的种类不同，利用糖的速度也不同。例如，青霉素和链霉素的生产菌适用葡萄糖作碳源，青霉素产生菌对葡萄糖的利用速度大于链霉素产生菌的利用速度，土霉素、四环素