第4章消毒与灭菌介绍.doc

第4章 消毒与灭菌 消毒与灭菌是临床医学和微生物学中十分重要的基本操作技术。由于微生物广泛存在于自然界，其中有些又是病原微生物，因此，从预防感染的角度出发，医务工作者必须牢固树立无菌观念和严格执行无菌操作。例如医疗器械、注射器、手术室和无菌室等均需用适宜的方法进行消毒或灭菌。为防止疾病传播，对于传染病患者的排泄物以及实验室废弃的培养物也要进行消毒或灭菌处理。微生物易受外界条件的影响，如果环境适宜，可促进微生物的生长繁殖；剧烈的环境变化则可使微生物生长受到抑制至死亡。采用的方法不同，达到的效果也有差异。以下是有关消毒灭菌的常用术语。 1．消毒（disinfection） 指，但（disinfectant） 2．（sterilization） 指， 3．防腐（antisepsis）是指0.01% 硫柳汞可防止杂菌生长一般 一些抗生素可抑制微生物的生长繁殖称之为抑菌（bacteriostasis）（bacteriostat）,在体外可用于抑菌试验以检测细菌对抗生素的敏感性。 4．无菌（asepsis）及(aseptic technique) 无菌指，， 第一节 物理消毒灭菌法 一、热力灭菌法 55～60℃作用30～60分钟后死亡80℃作用5～10分钟5～10分钟3～5小时才死亡。 （一） 干热灭菌法 干热（dry heat）的杀菌作用是利用火焰、热空气及电磁波产热等方法，使微生物脱水、干燥,细胞内化学成分氧化和大分子变性而达到灭菌的目的。 1．焚烧和烧灼法 是一种彻底的灭菌方法。废弃的物品或有感染性的动物尸体等可以直接点燃或在焚烧炉内焚烧。微生物学实验室用的接种环、试管口、瓶口等的灭菌用烧灼的方法。 2．干烤 利用干烤箱灭菌，一般加热至160～170℃经2 小时。适用于高温下不变质、不损坏、不蒸发的物品，例如玻璃器皿、瓷器、玻璃注射器等的灭菌。 3．红外线 红外线是一种0.77～1000μm波长的电磁波。波长在1～10μm时 （二） 湿热灭菌法 1．巴氏消毒法（pasteurization） 用较低温度杀灭液体中的病原菌（如结核分枝杆菌、布氏菌等）或特定微生物，而仍保持物品中所需的成分不被破坏的消毒方法。此法由巴斯德创立。方法是加热至61.1～62.8℃ 30分钟或71.715～30秒，目前多采用后者。主要用于牛乳的消毒。 2．煮沸法（boiling water） 在1个大气压下，水的煮沸温度为100℃，5 分钟可杀死一切细菌繁殖体，而细菌的芽胞则需3h，对个别细菌的芽胞则需5才能杀死。若在水中加2%的碳酸钠，可提高沸点温度达105℃，不仅可缩短煮沸时间，还可防止金属器皿生锈。煮沸法可用于餐具、金属器皿的消毒，时间至少应在10分钟以上。煮沸法不适合在海拔较高的地方使用。 (free-flowing steam) 又称常压蒸汽消毒法，在一个大气压下，利用水煮沸时产生的蒸汽进行消毒。细菌繁殖体经10015～30 分钟被杀死，但不易杀死芽胞。Arnold消毒器，我国的蒸笼具有相同的原理。可用于一般外科器械、注射器、食具和一些不耐高热物品的消毒。 5．间歇蒸气灭菌法（fractional sterilization）,以达到灭菌的目的。方法是将需要灭菌的物品放入Arnold灭菌器（可用蒸笼代替）中，经100℃15～30 分钟，37℃孵箱过夜，，，是一种最有效、最常用的灭菌方法。其原理是用密闭灭菌器使压力上升至103.4kPa(或1.05kg/cm2)，水的沸点达到121.3℃，保持15～20分钟，即可杀死所有微生物。常用于细菌培养基、玻璃器皿、生理盐水、手术敷料等制品的灭菌。 二、辐射杀菌法 （）（ultraviolet radiation, UV） 紫外线的波长为10～400nm，波长在240～280nm的紫外线（包括日光中的紫外线）均具有杀菌作用，其中以265～266nm杀菌作用最强，这与DNA的吸收光谱范围一致。紫外线的杀菌机理是作用于DNA，使一条DNA链上相邻两个胸腺嘧啶共价结合而形成二聚体，干扰DNA的转录复制，进而影响蛋白质合成而引起微生物的死亡。适用于空气、物体表面的消毒灭菌，如无菌室、手术室、烧伤病房、传染病房、细胞培养室的空气消毒及不耐热物品的消毒。 ，并可诱发皮肤癌，应注意防护。 X射线、γ射线和高速电子等。在足够剂量时，电离辐射可在瞬间产生大量的自由基，能破坏DNA的正常复制，损伤细胞膜以及产生H2O2都对细菌有致死作用。生物制品微波是一种波长为1mm到m的超高频电磁波，其机理是利用高频电场产生高频电磁场造成分子剧烈运动而产生热量，使微生物蛋白质变性凝固。微波常用微波炉有2 450MHz（2450兆赫）和915MHz。微波对人体有害，应减少接近工作中的微波炉的次数。 滤过除菌法（fil