实验三细菌芽孢和鞭毛染色法.pptVIP

实 验 三 细菌的芽孢染色及鞭毛染色 一、实验目的 学习并掌握芽孢染色法、鞭毛染色法。 初步了解芽孢杆菌、细菌鞭毛的形态特征。 巩固无菌操作技术 二、基本原理 三、实验器材 菌种　枯草芽孢杆菌，变形杆菌 染色剂　5％孔雀绿水溶液，0.5％番红水溶液，硝酸银鞭毛染色液（ A液，B液） 其他　显微镜，酒精灯，双层瓶，载玻片，木夹子，生理盐水，等。 四、实验步骤 1、鞭毛染色 载玻片——一端加一滴水——挑菌——在水滴中轻沾几下——将玻片稍倾斜——自然干燥——A液覆盖（5-10min）——充分水洗——B液冲去残水 ，B液覆盖——涂面出现明显褐色时——水洗——自然干燥（倾斜）——镜检 2、芽孢染色 涂片——干燥——固定——染色（孔雀绿，加热，微冒蒸汽且不干，10min）——水洗（玻片冷却后）——复染（番红，3min）——水洗——干燥（倾斜）——镜检 五、实验结果 绘图（油镜下）：芽孢、鞭毛 六、思考题 1. 用简单染色法能否观察到细菌的芽孢？ 2. 鞭毛染色要注意那些环节？ * * 芽孢染色法： 芽孢是细菌的休眠体。细菌能否形成芽孢以及芽孢的形状、芽孢在芽孢囊内的位置、芽孢囊是否膨大等特征是鉴定细菌的依据之一。 芽孢壁厚、透性低、不易着色，用着色力强的染色剂孔雀绿或石炭酸复红，在加热条件下染色，使染料不仅进入菌体也可进入芽孢内，进入菌体的染料经水洗后被脱色，而芽孢一经着色难以被水洗脱，当用对比度大的复染剂染色后，芽孢仍保留初染剂的颜色，而菌体和芽孢囊被染成复染剂的颜色，使芽孢和菌体更易于区分。 2. 鞭毛染色法： 鞭毛是细菌的运动“器官”，细菌是否具有鞭毛，以及鞭毛着生的位置和数目是细菌的一项重要形态特征。细菌的鞭毛很纤细，其直径通常为0.01~0.02μm，一般细菌的鞭毛均不能用光学显微镜直接观察到 。在染色前先用媒染剂处理，使它沉积在鞭毛上，使鞭毛直径加粗，然后再进行染色。 细菌鞭毛显微镜照片