登革病毒实验室检测技术精美自制—培训课件.pptVIP

登革病毒的核酸检测：PCR检测与鉴定登革病毒处理流程 血清（细胞上清或组织研磨液） 病毒RNA提取 cDNA的合成 登革病毒型特异引物PCR扩增 凝胶电泳，结果判断 用QIAamp Viral RNA Kit或者Roche Viral RNA Kit提取病毒RNA 根据PCR特异性产物片段大小进行判断 RT-PCR检测登革病毒基因与分型登革热诊断标准（WS216-2008） 型别 引物名称 引物序列（5’－3’）　　 扩增片段 通用引物 D1 TGAATATGCTGAAACGCGCGAGAAACCG D2 TTGCACCAACAGTCAATGTCTTCAGGTTC 511bp 1型登革病毒 D1 TGAATATGCTGAAACGCGCGAGAAACCG 482 bp TS1 CGTCTCAGTGATCCGGGGG 2型登革病毒 D1 TGAATATGCTGAAACGCGCGAGAAACCG 119bp TS2 CGCCAGAAGGGCCATGAACAG 3型登革病毒 D1 TGAATATGCTGAAACGCGCGAGAAACCG 290bp TS3 TAACATCATCATGAGACAGAGC 4型登革病毒 D1 TGAATATGCTGAAACGCGCGAGAAACCG 392bp TS4 CTCTGTTGTCTTAAACAAGAGA 500bp 500bp 通用引物PCR