第七章_花药培养和花粉培养资料.ppt

第七章 主要内容 花粉和花药培养技术 花粉和花药培养应用 (1) 掌握花药培养和花粉培养的区别 (2) 了解花药最佳接种时期 (3) 掌握花药培养的大致过程 (4) 掌握花粉发育的四种途径 (5) 掌握花粉培养的大致过程 花药培养 是将花粉发育至一定阶段的花药接种到人工培养基上进行培养，以形成花粉胚或愈伤组织进而分化成植株的技术。 草莓　 花药培养脱毒 1974年日本：花药培养可以脱除草莓病毒； 花药采取时期　单核期：花蕾4-6mm，花药1mm 花药诱导愈伤组织培养基 MS + IAA4mg/L + BA2mg/L + KT2mg/L +蔗糖30g+琼脂7g/L 增殖培养基　MS + GA1mg/L+ IBA0.2mg/L + BA1mg/L+ 蔗糖30g + 琼脂7g/L 生根培养基　1/2MS + IBA0.2mg/L + 活性炭3g/L + 蔗糖20g + 琼脂7g/L 三、花粉培养 花粉培养成苗途径与花药培养比较: 相同点： 胚状体成苗途径、愈伤组织再分化成苗途径 不同点： 花粉培养： 需进行花粉的分离 特殊的花粉诱导培养 二、培养基 1、基本培养基 MS和H培养基：适合双子叶植物花药培养 B5培养基：适合豆科和十字花科花药培养 N6培养基：适合禾谷类作物的花药培养 较高浓度蔗糖可诱导花粉形成愈伤组织 较低浓度蔗糖可使愈伤组织分化成苗 三、单倍体植株染色体加倍的方法 单倍体植物天然发生的途径： 单倍体植株染色体加倍的方法 1、自然加倍 2、人工加倍：用秋水仙素溶液浸苗、处理愈伤组织和用含0.4%秋水仙素的羊毛脂涂抹单倍体植株的顶芽、腋芽，可得到能结实的二倍体植株。 3、愈伤组织反复继代培养，可得到二倍体植株。 ①花药培养是器官培养，花粉培养属细胞培养。 ②花药培养一般选择花粉的单核期进行接种。 ③花药培养包括：选择材料、消毒、接种培养、愈合组织生成、分化出单倍体植株。 ④花粉的发育途径包括：营养细胞发育、生殖细胞发育、营养和生殖细胞同时发育及花粉均等分裂发育。 ⑤花粉培养包括花粉的分离、预处理、培养过程。 思考题 花药培养的研究意义 花药培养方法 毛曼陀罗花药培养，并诱发再生植株 一、花粉培养的操作过程 选幼年玉兰树花蕾 取下花蕾（镜检） 预培养数天 取花药 接种 分离 花粉 药壁向花粉提供营养物质 通过药壁吸收、贮存和转化培养基中的外源物质 过滤离心 再生 低温预处理 消毒 1. 基本培养基 2. 激素种类和浓度 3. 蔗糖浓度 细胞分裂素可促进胚状体形成 生长素可诱导愈伤组织形成 细胞分裂素与生长素比值高时可诱导愈伤组织分化苗 2、激素种类和浓度 3、蔗糖浓度 孤雌生殖 无配子生殖 孤雄生殖 也称单性生殖，即卵不经过受精也能发育成正常的新个体，如黄瓜 是指配子体可以不经过配子的结合而直接产生孢子体的，如蕨类植物 是指由雄性配子直接进行胚胎发育成新个体。通常由杂交或实验处理后获得的，自然界中很少发生 　小　结 安徽大学《细胞工程》精品课程　陈勤 花药培养和花粉培养 教学目的与要求 胚珠 花的结构 花药是花的雄性器官，花药培养属器官培养； 花粉是单倍体细胞，花粉培养与单细胞培养相似 花药和花粉都可以在培养过程中诱导单倍体细胞系和单倍体植株。 单倍体植株经过染色体加倍就成为纯合二倍体植株，这样可缩短育种周期，获得纯系。花培已成为植物育种的一种重要手段。 一、概　述 植物的花粉是花粉母细胞经减数分裂形成的，其染色体数目只有体细胞的一半，叫做单倍体细胞(haploid cell)。 花粉和花药的培养(pollen and anther culture)是指花粉在培养基上改变其正常发育和机能，不经受精而发生细胞分裂，由单个花粉粒发育成完整植株的技术。 用离体培养花药的方法使花粉发育成一个完整的植株，叫做单倍体植物(haplobiont)。 一、概　述 花粉和花药培养的研究意义 诱导形成单倍体，快速获得纯系，缩短育种周期 有利于筛选隐性突变体，提高选择效率 获得无病毒个体 有利于隐性基因控制性状的选择 快速获得自交系的超雄株 单倍体植株育种 花药培养简史 1964年：印度学者古哈(Guha)和马斯瓦瑞 （Maheswari ）将南洋金花花药培养发育成胚 1967年：包金(Bourgin)和尼奇(Nitsch)花药培养获得烟草植株 1973年：我国首次报道了小麦花药培养获得再生植株 目前：许多农作物及经济植物通过花粉培养都能诱导成植株 花药培养的主要目的，是培育花粉粒的单倍体植株，并使单倍体加倍，作为育种材料的来源。 利用杂种花药离体培养获得的再生植株，由不同基因型的配子发育而来，具有丰富的变异类型，选择出有利的变异类型，经过经济性状鉴定后，选出优良者直接用于生产或