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- 2017-06-19 发布于天津
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表达蛋白质组学研究方法
* * * * 另一类是技术上的假阳性 即由于双杂交技术上的局限而鉴定出的蛋白质与蛋白质间的相互作用。 包括筛库过程中自发升高的BD-x融合蛋白自我激活导致的假阳性,在BD-x融合蛋白不存在的情况下AD-Y融合蛋白单独激活报告基因,导致的假阳性,以及酵母中其他蛋白质作用引起的假阳性等。 因此,虽然双杂交系统可筛选出大量蛋白质相互作用,但其中部分蛋白质在生理状态下可能不发生相互作用,双杂交只是反映蛋白质间能发生作用的可能性,这种可能性还必须经过其他实验验证,尤其要与生理功能研究相结合,否则可能会误入歧途。 酵母双杂交体系的新发展 传统酵母双杂交体系的改建 根据酵母的营养缺陷,发展了多重筛选机制 表达载体构建的改进 将蛋白的相互作用场所从核内移至细胞膜 哺乳动物细胞双杂交系统 三杂交系统的产生:用于研究蛋白和RNA间的相互作用。 * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 功能蛋白质组学研究方法 功能蛋白质组学是指对蛋白质间、蛋白质- DNA/RNA 间的相互作用的研究。以细胞内与某个功能有关或某种条件下的一群蛋白质为主要研究内容, 由此建立细胞内外信号传递的复杂网络。 蛋白质芯片技术 噬菌体展示技术 酵母双杂交系统 蛋白质芯片 蛋白质芯片是将大量蛋白质分子按预
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