一级性病实验室操作的手册.doc

实验室操作手册 （性病分册） 生殖器标本取材方法及注意事项 男性标本: (1)如疑为急性淋病奈瑟菌或其他化脓性细菌感染应在清洗龟头部后,以碘伏或其它非粘膜刺激性消毒后,挤出分泌物立即以无菌棉拭子采取,立即送检,或以专用的细拭子插入尿道口1—2cm,旋转采取.(2)如疑为前列腺炎、精囊炎慢性淋病奈瑟菌感染应由医师按摩前列腺,以无菌手续自尿道口采取前列腺液送检. 女性标本:(1)成年妇女自宫颈采取标本,应在扩阴器的支下,选取有炎症或分泌物部位,先以无菌棉拭子拭去表浅层分泌物,再用另一拭子取分泌物送检.如做厌氧或真菌培养应另外采取标本.如未成年幼女疑患性传播疾病时,不应使用扩阴器,应以无菌拭子在阴道口处采取分泌物送检. 对不合格标本的处理 申请单项目与标本不符. 申请单姓名、科别、床号和标本的档签不符. 标本已有明显的污染迹象(如开塞). 送检标本不符合上述取材要求.. 标本过少或已明显干燥. 申请单项目的项目填写不符合要求或无医师签字. 送检标本的时间已明显拖延. 当标本符合以上任何一条都作为不合格样本,必须重新采取样品且核对标本无误后才可以进行下一步实验. 淋病的涂片检查 〖原理〗 急性淋菌性尿道炎病人常有大量黄色分泌物,在有些脓细胞内可有许多淋球菌,淋球菌革兰染色革兰阴性双球茵.检查分泌物涂片中有无典型细胞内革兰阴性双球茵,可作初步诊断淋病的依据.〖试剂〗 采用自配革兰氏染液,试剂见试剂配制附录. 〖方法〗 1.取材:男性:拭子蘸取无菌生理盐水,插入尿道2-3cm,轻轻转动, 停留数 . 女性:宫颈拭子蘸取无菌生理盐水先将宫颈口的分泌物擦去,拭子插入宫颈内政-1.5cm,转动并停留驾齐驱20-30秒,取出涂片. 2.涂片后,待自然干燥后火焰固定,革兰染色,油镜镜检. 〖结果〗 部分白细胞的胞浆中有圆形或卵圆形、成双排列的革兰阴性双球茵,两茵接触面扁平或稍凹,茵体大小可有差异.菌体长约0.7um,宽约0.5um 〖注意事项〗 涂片时不要太用力,轻轻滚动,以免炎症细胞浆内淋球菌因细胞破坏而溢出细胞. 涂片厚薄适宜.脱色时间应以涂片的厚薄而定,过厚而脱色清足时,革兰氏阴性误染成阳性. 固定涂片时,只要将涂片迅速通过火焰二三次,避免加热过度使细胞变形. 报告结果时应注明细胞或细胞外发现革兰氏阴性双球菌. 〖临床意义〗 细胞内革兰氏阴性双球菌为淋病患者的诊断标准.男性淋菌性尿道炎检出敏感性和特异性在95%以上,具有初步诊断的价值,但女性患者由于其它杂菌的影响,检出敏感性仅50%,且特异性较差,故世界卫生组织不推荐将涂片法用于女性淋病患者的诊断.同时也不推荐用于诊断淋菌性直肠和咽部感染. 衣原体C—C快速免疫测定法 〖原理〗 本试验是将衣原体单克隆抗体的带色乳胶复合物吸附于滤纸上,将滤纸夹在二块塑料板中间.若加入的标本为阳性,则标本中的抗原与结合有乳胶的单抗结合,复合物因毛细作用向前扩散移动至结果窗,可被该处含有的未标记的鼠抗衣原体单抗所捕捉,在结果窗中出现一条黑线,标本即为阳性,过剩的未结合的带色乳胶标记的鼠抗衣原体单抗可移到质控窗,与该处的兔抗鼠抗体结合,显现一条黑线. 〖试剂〗 本试验采用立明试剂盒.试剂名称为:快速沙眼衣原体胶体金测定 〖方法〗 1.将试剂﹑反应板和塑料管自冰箱取出置室温度30分钟. 2.加试剂1至塑料管刻度(0.6ml),将取材拭子放入管内,搅混80+2℃水浴10分钟—12分钟,使细胞中衣原体的脂多糖释放出来.取出后,沿管壁转动挤压拭子并丢之,加盖后放室温中5分钟冷却. 3.将测拭板平放,加5滴提取液于检测窗,静置15分钟—30分钟后观察结果. 4.阳性对照试验:取试剂2加5滴于塑料管,再加试剂1至刻度,以下操作按3﹑4进行,结果应出现阳性反应. 〖结果〗 应另取测试板进标本为阳性时,结果窗中显示一条黑色线.强阳性者黑线色深,出现时间快,出现隐约可见的黑线也判为阳性. 8520/质控窗显示一条黑线,表示标本试剂质量可靠,试验正确.如30分钟内,未见黑线出现,应另取测试板进行试验. 〖临床意义〗 作衣原体诊断的参考.结果阳性表示病人可能有衣原体感染,但需要结合临床症状全面考虑. 《注意事项》 1.标本中需要一定量抗原,提取的抗原低于试验敏感性时可出现假阴性,因此,每批试验应同时用阳性对照标本测试,并在质控窗和结果窗均出现一条黑线. 2.如本试验阴性而病人持续有症状则应作衣原体培养. 3.本试验检测的是衣原体抗原,因而不能区别是衣原体的感染还是携带者 ,也不能区别衣原体的死活,不能作判愈试验. 4.不要混合不同的试剂和用具,不要盖错瓶盖. 5.试剂中含有叠氮化钠,它与铝﹑铜等金属可起反应引起爆炸,应避免接触此类金属器具,处理时可用大量水冲洗, 6.衣原体可多