差示旋光法.pptVIP

钼蓝比色法 逯家辉等提出了一种测定维生素C的新方法，它是基于Folin B试剂与抗坏血酸在pH=3的三氯乙酸酸性介质中反应生成脱氢抗坏血酸，反应产物在910 nm波长处有最大吸光度进行定量分析。该方法的线性范围为0～50．0μg／mL，相关系数r=0．999 86，回收率为98．12％～102．15％。  ——差示旋光法 原理 方法 结果 维生素C片在不同PH值的溶液中旋光度有显著差异，而片剂辅料旋光度保持不变 差示旋光法消除辅料的影响，直接测出该制剂的含量 讨论 与  ——差示旋光法 方法 TEXT 1）标准溶液的配制 准确称取维生素C精制品5.0g，乙二胺四乙酸钠0.37g,置于100mL容量瓶中,用新沸冷却的蒸馏水溶解,加水到指定刻度,配制成50mg/mL的维生素C标准溶液。 TEXT 原理 方法 结果 讨论 与  ——差示旋光法 2）比旋光度与溶液pH值的关系 量取10.0mL维生素C标准液于50mL量瓶中,用水稀释至50mL。测定溶液的pH及旋光度,然后逐次分批加入氢氧化钠固体(每次约50mg),每次溶解后,测定一次溶液的pH及其旋光度,得到维生素C溶液的pH及旋光度关系 原理 方法 结果 讨论 与 ——差示旋光法 选定pH为2.2和6.2  ——差示旋光法 2）差示旋光度与溶液浓度关系 吸取2.0、4.0、8.0、16.0、20.0mL的维生素C标准液各两份,分别置于50mL的容量瓶,一份用pH2.2的盐酸盐缓冲液定容；一份用pH6.2的磷酸盐缓冲液定容，静置3min后,用220mm测定管，以前者为空白，测定后者的差示旋光度(△a)。 文献结果：线性方程为△a=0 205*C+ 0．05，r=0．9964 原理 方法 结果 讨论 与 ——差示旋光法 3）辅料干扰试验 取混合辅料20mg(淀粉、硬脂酸镁、EDTA、糊精等按处方比例混匀)两份分别置于50mL的容量瓶,一份用pH2.2的盐酸盐缓冲液定容,一份用pH6.2的磷酸盐缓冲液定容,滤去不溶物,滤液在两种pH值测定差示旋光度。 文献结果：辅料的差示旋光度为零，说明辅料对维生素C含量的测定不干扰。 原理 方法 结果 讨论 与  ——差示旋光法 4）稳定性试验 同一测试样品，在120min内，每隔3min测定一次差示旋光度。 文献结果：差示旋光度基本不变 原理 方法 结果 讨论 与  ——差示旋光法 5）回收率试验 精密称取维生素C精制品500.0mg两份，分别置于50mL容量瓶中，各加入20mg辅料，分别用盐酸盐缓冲液及磷酸盐缓冲液配制成50mL溶液，测定差示旋光度。 文献结果：平均回收率为97.8％，变异系数cv为1.03％ 原理 方法 结果 讨论 与  ——差示旋光法 方法 TEXT 6）样品测定 取维生素C片剂10片，称重研碎后分别用盐酸盐缓冲液及磷酸盐缓冲液配制成50mL溶液(相当于含Vc 20mg/mL)，滤去不溶物，测定滤液的差示旋光度，根据回归方程计算其含量。 TEXT 原理 讨论 方法 结果 与 ——差示旋光法 方法 TEXT 1）维生素易被氧化,空气及水中的氧均可使其氧化分解，配制溶液时使用新沸冷却水,同时加人EDTA作为稳定剂； 2）样品测定时，片剂部分物质不能完全溶解，必须过滤除去，然后测定滤液的差示旋光度。 TEXT 原理 讨论 方法 结果 与 3 高效液相色谱法测定维生素C 3.1 HYPERSIL—C8色谱柱法 3.2 VenusilXBP—C18柱法 3.3 其他方法 HYPERSIL—C8色谱柱法 采用HYPERSIL—C 8色谱柱，用0．1％低浓度的草酸作流动相，陈昌云等采用0．05 mol／L磷酸二氢钾缓冲液：甲醇=80：20 (v／v)作流动相。流速为1．0mL／min，二极管阵列检测器，检测波长为254 nm。 3.2 VenusilXBP—C18柱法 系统采用VenusilXBP—C18柱(4．6x250 mm，5μg)，用0．2％的偏磷酸的水溶液作为流动相，流速1 ml／min，检测波长240 nm；维生素C浓度在0．1-1．0 mg／mL范围内有良好的线性关系。该方法回收率99．89％，标准偏差0．91，操作简便、灵敏、可靠 薄层扫描法 原理 维生素C具有 较强还原性，可使蓝色染料2，6-二氯靛酚钠定量地还原成无色的酚亚胺，而本身被氧化成去氢抗坏血酸，利用此特征进行薄层扫描法测定含量。 薄层扫描法 操作方法与结果 （1）试纸的制备 2,6-二氯靛酚钠 (DCP-Na)溶于无水乙醇配成0.05%的DCP-Na乙醇溶液，滤纸在盛有DCP-Na乙醇溶液的展开缸中浸渍3min，边浸边摇展开缸，使滤纸均匀着色，充