第五章 宁波基内生物技术有限公司.PDFVIP

宁波基内生物技术有限公司 宁波基内生物技术有限公司 GENEINN BIOTECHNOLOGY PCR20+基因扩增仪 1 宁波基内生物技术有限公司 一、产品介绍 聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction ）简称PCR 。聚合酶链式反应，是体外酶 促合成特异DNA 片段的一种方法，由高温变性、低温退火及适温延伸等几步反应组成一个 周期，循环进行，使目的DNA 得以迅速扩增，具有特异性强、灵敏度高、操作简便、省时 等特点。它不仅可用于基因克隆和核酸序列分析等基础研究，还可用于疾病的诊断等其他涉 及DNA，RNA 的领域。 宁波基内生物技术有限公司研制生产的基础型 PCR 扩增仪，其整个系统由主机，加热 模块，PCR 管样品基座，热盖，控制软件组成。适用于DNA 扩增和RNA 的逆转录扩增。 该系统具有灵敏度高、升温快、反应速度快、操作方便等优点。 二、 性能参数 样本容量 20X0.2ml 温度范围 4-99.9 ℃ 升降温速率 2 ℃/秒 控温精度 ≤ ±0.1℃ 热盖温度范围 105℃ 程序储存量 50 个文件 操作方式 一键旋钮输入 最大循环次数 99 次 三、产品特点 1. 优化的控温模式，升降温速度快，温控精确，热效率高 2. 进口核心部件，低通量温度均匀性好 3. 低通量，适合于教学及科研摸索条件 4. 无油热盖调节方便，彻底防止蒸发 5. 仪器操作简单，人机界面友好 6. 体积小，重量轻，噪声低，节省实验室空间 7. 单键旋钮控制简单易用 8. 自动断电保护，恢复供电后自动执行未完成循环，保证扩增全过程安全运行 9. 独有的 12V 车载电源适合野外作业 2 宁波基内生物技术有限公司 四、工作原理 该技术是在模板DNA、引物和四种脱氧核糖核苷酸存在下，依赖于DNA 聚合酶的酶促合 成反应。DNA 聚合酶以单链DNA 为模板，借助一小段双链DNA 来启动合成，通过一个或两个 人工合成的寡核苷酸引物与单链DNA 模板中的一段互补序列结合，形成部分双链。在适宜的 温度和环境下，DNA 聚合酶将脱氧单核苷酸加到引物3´-OH 末端，并以此为起始点，沿模板 5´→3´方向延伸，合成一条新的DNA 互补链。 PCR 反应的基本成分包括：模板DNA(待扩增DNA)、引物、4 种脱氧核苷酸(dNTPs)、DNA 聚合酶和适宜的缓冲液。类似于DNA 的天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的 寡核苷酸引物。PCR 由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成：①模板DNA 的高温变性； ②模板DNA 与引物的低温退火(复性)；③引物的适温延伸。 五、操作流程 1. 开机： 1). 首先准备好反应管 2). 打开机盖，将反应管平稳、端正地置入，盖好机盖 3). 打开电源开关，按照机器屏幕显示的提示设定程序 2. 程序设置： 1). 循环次数设定 2). 是否选用热盖功能 3). 第一阶段：变性温度和保温时间 4). 第二阶段：三组循环条件设置：包括变性、退火、延伸的温度和时间以及每组条件的循 环次数 5). 第三阶段：总延伸温度及时间 6). 第四阶段：低温保存时间及温度选择。温度可选4 ℃或25℃。时间调为99分钟时为无限 3 宁波基内生物技术有限公司 期保存 3. 设置过程： 1).