植物功能基因组学研究的有效工具———rnai 技术.pdf

植物生理学通讯! 第$ 卷 第’ 期，##$ 年( 月 =# 植物生理与分子生物学!#$% !’()**+’ #$, -*./0#1 2)**+’ 植物功能基因组学研究的有效工具———345) 技术 ! 王! 雷! 种! 康 ! 许智宏（中国科学院植物研究所光合与环境分子生理学重点实验室，北京(###$ ） 345) 6./$**+’—5$ 788./%)9. 6** 8*1 !#$% :0$/%)*$# ;.$*)/( )?@ A;. ，BCD?@ E-34 ! ，FG H1.%C234 （!# $%’(%)’(# ’* +,’)’-#.),-/- %.0 1.2/(’.3.)%4 5’4674%( +,#-/’4’8# ，9.-)/)7) ’* :’)%.# ，;,/.- 6%03# ’* =6/.6- ，:/ /.8 (###$ ） 提要! 综述了I?) 干扰的机制以及在生物体内的功能等方面的研究进展，并对在此基础上发展起来的I?) 干扰技术在 植物功能基因组学中的应用情况作了简要的介绍。 关键词! I?) 干扰；机制；植物功能基因组学 ! ! 植物分子生物学研究的重要模式植物拟南芥 I?) 在细胞中的作用研究成为生命科学研究的最 ［(］ ［((］ 的基因组测序已于### 年( 月完成 ，作为重要 热点，并被认为是## 年重大科学发现之一 。 农作物和模式单子叶植物的水稻的基因组测序已 = 345 干扰的机制 获得大量基因组序列信息［ J K ］，植物生物学的研究 ! ! 在大多数真核生物细胞中，I?) 干扰和共抑 热点将转向功能基因组学。如何确定大量的基因 制（02%7TQQO;7.23 ）以及病毒诱导的基因沉默共享一 序列的功能，并进而了解基因与基因之间通过其产 种相似的机制［’ ］。这种机制主要是由S7I?) 所诱 物而形成的控制生物体代谢和发育的调节网络，是 导，都发生在转录后水平。由于线虫和果蝇自身的 功能基因组学研究的核心问题。遗传突变体是研 一些特性，使它们成为目前关于I?) 干扰机制研 究基因功能的重要手段。:%L?) 插入失活法、激活 究的主要实验对象。基于这两种实验生物，研究者 标签技术（-0M.N-M.23 M-O4;M.34 ）、化学诱变和物理诱 们概括出了I?). 机制的可能途径：内源或外源的 变等方法已获得了大量的拟南芥和水稻突变体。 I?) 在生物体内形成S7I?) ，然后，S7I?) 被一种 但采用这些方法研究基因的功能具有较大的随机 称为L.0;O 的蛋白切割成( J $ 碱基的干扰性 性，需要筛选大量的突变体，工作量大。在基于对 I?) （7,-// .3M;OU;O;30; I?) ，7.I?) ），7.I?) 与 已知序列的+P: 或0L?) 进行反向遗传学的功能 I?) 诱导的沉默复合体（I?)%.3ST0;S 7./;30.34 研究时，获得该基因的功能缺失突变体的一种方法 02,Q/;V ，IWPB ）结合，结合了7.I?) 的IWPB 可以 ［ ］ 被):R 活化，活化形式的IWPB 利用其所包含的没 是反义 I?) （-3M.7;37; I?) ）表达技术 。但是， 有解链的7.I?) 作为向导，通过-M723%BO.05 碱基 反义I?) 表达技术的效率往往不能达到理想的功 互补配对，进行底物的选择性降解，从而也决定了 能缺失，因而无法对基因功能进行大规模的准确分 I?) 干扰的序列特异性。底物被识别后，IWPB 即 析。这就使其应用受到一定的限制。 能切割底物,I?) ，使基因的翻译水平下降，起到 目前，人们发现在生物体内普遍存在一种保守