第二章骨髓细胞学检验.ppt

课堂目标 掌握：骨髓检查的适应症及禁忌症、临床应用，标本的采集，正常骨髓象的特征，常见血液疾病的血液学特征。 熟悉：血细胞的发育过程，如何正确读取骨髓报告单。 了解：骨髓检验的步骤，常用血细胞组织化学染色。 第一节 概述 一、血细胞的发育过程 1、造血干细胞（Hematopoietic Stem Cell, HSC ） 定义： 一种具有高度自我更新能力和多向分化、增殖能力的最早的造血细胞。 特征： A 具有多向方分化能力；??????????B 具有自我更新的能力??????????C 形态上类似于小淋巴细胞? D 具有一定的表面标志。干细胞的表面 标志是：CD34+CD38－ 2、造血祖细胞（Hematopoietic rogenitor Cell, HpC ） 定义： 一种由造血干细胞分化而来但失去自我更新能力的过渡性、增殖性细胞群，又称定向干细胞。 特征： A 具有定向方分化能力；??????????B 具有增殖能力??????????C 形态上类似于小淋巴细胞? D 具有一定的表面标志。 例：骼后上棘穿刺术 ④以左手拇指和示指将穿刺部位的皮肤压紧固定，右手持穿刺针与骨棘面垂直，旋转刺人骼后上棘，达骨髓腔时有空松感，深度约为针头达骨膜后再刺入l cm左右。 ⑤拔出针芯，接l0 ml干燥注射器，轻轻负压抽取，抽取骨髓液不超过0.2ml，立即置载玻片上，并涂片。 ⑥必要时再取骨髓液0.5~2m1，置肝素抗凝管内，作有核细胞计数等项检查。 ⑦拔出穿刺针，压迫伤口，敷以消毒纱布。 正常血片 正常骨髓象 POX染色结果(a) - (b)± (c) + (d)++ (e) +++ (f)++++ 二、酯酶染色 酯酶是分解各种酯类的水解酶，根据机制的不同，分为非特异性酯酶和特异性酯酶。单核巨噬细胞类为非特异性酯酶反应而染色中性粒细胞类则为特异性酯酶反应而染色，因此在判别单核细胞类或中性粒细胞类时非常有用，特别是二重染色法非常重要。 【原理】 细胞内的α-乙酸萘酚酯酶（α-NAE）在pH中性的条件下水解基质液中的α-乙酸萘酚，释放出α-萘酚，进而与基质液中的重氮盐偶联形成不溶性的有色沉淀（棕黑色或灰黑色），定位于细胞质内酶所在的部位。本试验常用的重氮盐为坚牢蓝B，形成的有色沉淀为棕黑色或灰黑色，α-NAE存在于单核细胞、粒细胞和淋巴细胞中，故它是一种中性非特异性酯酶。 NAS-DAE染色结果 (a) - (b)± (c) + (d)++ (e) +++ (f)++++ （2）有助于鉴别T、B淋巴细胞的鉴别 : 成熟T淋巴细胞胞质内有深红色、圆形、边缘清楚，点状颗粒1-2个，呈明显局限性分布。B淋巴细胞阴性 （3）骨髓瘤、多毛细胞白血病、T-淋巴细胞瘤呈阳性反应，恶性组织细胞病呈很强弥散阳性反应，粒细胞可呈单核样着色。 ①（－）灰褐色沉淀，为0分。 ②（＋）胞质出现灰褐色沉淀，为1分。 ③（＋＋）胞质深褐色沉淀，为2分。 ④（＋＋＋）胞质中已基本充满棕黑色颗粒状沉淀，但密度较低，为3分。 ⑤（＋＋＋＋）胞质全被深黑色团块沉淀所充满，密度高，甚至遮盖胞核，为4分。 四、白血病 白血病属于造血系统的恶性肿瘤，是造血干细胞的恶性、克隆性疾病。白血病具有恶性增殖能力，但因分化成熟受阻而停滞在不同的发育阶段，积聚于骨髓并可浸润其他组织器官，而正常造血受抑制，表现出不同程度的贫血、出血、感染以及肝脾淋巴结肿大等浸润现象。 （一）发病情况 我国白血病发病率约3.0～4.0/10万。在恶性肿瘤死亡率中，白血病在男女性中分别居第6和第8位，而在35岁以下人群中居首位。急性白血病多于慢性。成人急性白血病中以ANLL最多见，儿童中则以急性淋巴细胞白血病(ALL)较多见；在我国慢性白血病中以慢性髓细胞白血病(CML)多见，而欧美国家则以慢性淋巴细胞白血病(CLL)常见。 （二）病因和发病机制 1、病毒：人类T淋巴细胞病毒是成人T淋巴细胞 白血病（ATL）及淋巴瘤的病原体，又称人类T细胞白血病病毒（HTLV）。 2、放射：电离辐射有致白血病作用。 3、化学： 因素：多次化学物质和药物可诱发白血病。 苯及其衍生物致白血病的作用已经肯定。 4、遗传因素 5、免疫因素 （三）分类 按病程和细胞分化程度分类 1、急性白血病： 白血病细胞分化停滞在较早阶段，多为原始和早期幼稚细胞，病情发