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紫外分光光度计验收细则
UV-2550验收方案
参照JJG 178-2007及本企业对紫外可见分光光度计的一些技术要求,验收主要侧重下几方面:
一、紫外可见风光光度计的测试原理
溶液中待测物分子中的价电子能选择性吸收紫外或是可见光,从基态跃迁到激发态,形成紫外可见吸收光谱。根据紫外可见吸收光谱中的吸收峰和摩尔吸收系数,进行定性分析。
从光源辐射出的光经过波长选择器形成单色光,当单色光通过样品时,被样品中具有特征吸收的化合物吸收,吸光度和样品浓度的关系符合朗伯-比尔定律。见下式:
式中:
—吸光度
—线性吸收系数
—入射辐射光通量
—透射辐射光通量
—光路长度
—溶液中待测物浓度
当光路长度和吸收系数一定时,吸光度与溶液待测物浓度成正比。
二、试剂
蒸馏水(国标规定的实验室用三级水标准);
重铬酸钾,碘化钠,亚硝酸钠,高氯酸均为分析纯;
各标准溶液的配制:
1、10g/L的碘化钠溶液:称取已干燥过的的碘化钠5.0g(秤准至±0.1g)于烧杯中,用蒸馏水溶解,然后移入500mL容量瓶,用蒸馏水稀释至刻度,摇匀并避光保存。
2、50g/L的亚硝酸钠溶液:称取已干燥过的的亚硝酸钠25.0g(秤准至±0.1g)于烧杯中,用蒸馏水溶解,然后移入500mL容量瓶,用蒸馏水稀释至刻度,摇匀并避光保存。
3、60.00mg/L的重铬酸钾溶液:称取已干燥过的的重铬酸钾60.00mg,移入1L容量瓶中,用蒸馏水溶解,然后加入1ml1.0mol/l的高氯酸溶液,用蒸馏水稀释至质量为1000.0g,摇匀并避光保存。
三、验收标准及方法步骤
为了便于描述仪器性能指标,将仪器的检定波长划分为三段,A段(190~340nm)、B段(340~900nm)、C段(900~2600nm)。一般仪器性能可分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ四个等级,为快速可靠地检定仪器,可按以下顺序进行检定:基线平直度,噪声,波长准确度和重复性,最小普带宽度,吸收池配套性,杂散光,透射比准确度和重复性。
一)基线平直度
1、验收标准
表1基线平直度指标
级别A段B段C段Ⅰ±0.001±0.001±0.002Ⅱ±0.002±0.002±0.005Ⅲ±0.005±0.005±0.010Ⅳ±0.010±0.010±0.020
2、验收方法
设置仪???光谱带宽为2nm,中等扫描速度,采样间隔1nm,样品和参比皆为空白(蒸馏水)在200~850nm范围内进行光谱扫描,测量图谱起始点的吸光度与偏离起始点的最大吸光度之差即为基线平直度。
二)噪声和漂移
1、验收标准:
表2仪器噪声及漂移的要求
级别透射比为0%的噪声透射比为100%的噪声漂移Ⅰ≤0.05≤0.1≤0.1Ⅱ≤0.1≤0.2≤0.2Ⅲ≤0.2≤0.5≤0.5Ⅳ≤0.5≤1.0≤1.02、验收方法:
1)设置仪器扫描参数:定波长扫描:(A阶扫描波长:250nm;B阶扫描波长:400nm);光谱宽带:2nm;时间采样间隔:1s;光度测量方式:透光比;记录范围:99%~101%。
2)步骤:
噪声检定:将每个测量波长处设置的参比光束和样品光束皆为空气空白,调整仪器的透光比为100%,扫描2min,读出图谱上最大值和最小值之差,即为透光比为100%的噪声;在样品光路中插入挡光板并调整仪器透光比为0%,扫描2min,读出图谱上最大值和最小值之差,即为透光比为0%的噪声。(波长切换时允许见光稳定5min)
漂移检定:将每个测量波长处设置的参比光束和样品光束皆为空气空白,调整仪器的透光比为100%,扫描30min,读出图谱上最大值和最小值之差,即为透光比为100%的基线漂移。
三)波长准确度及重复性
1、验收标准:
表3波长最大误差(nm)
级别A段B段C段Ⅰ±0.3±0.5±1.0Ⅱ±0.5±1.0±2.0Ⅲ±1.0±4.0±4.0Ⅳ±2.0±6.0±6.0
表4波长重复性(nm)
级别A段B段C段Ⅰ≤0.1≤0.2≤0.5Ⅱ≤0.2≤0.5≤1.0Ⅲ≤0.5≤2.0≤2.0Ⅳ≤1.0≤3.0≤3.0
2、验收方法:
以重铬酸钾标准溶液为标准物质,检定仪器在紫外区的波长准确度及重复性。
1)设置仪器扫描参数:温度:25℃;检定波长:(=257nm,透射比:13.7%);扫描范围:(200~350nm);光谱宽带:2nm;慢速扫描;采样间隔:小于仪器波长重复性指标(<0.1s);光度测量方式:透光比;记录范围:99%~101%。
2)步骤:选择氘灯,根据仪器扫描参数进行设置,在检定波长257nm处用空气作为参比,调整仪器的透光比为100%,在样品光路中插入挡光板并调整仪器透光比为0%。然后
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