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低氧通过HIF-1α和HIF-2α上调SKOV3细胞Syndecan-1的表达.doc
低氧通过HIF-1α和HIF-2α上调SKOV3细胞Syndecan-1的表达
辛卫娟1,李婷2,赵鑫2,丁岩1,吴乾渝2*
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(1. 复旦大学附属妇产科医院妇产科,上海200032;2. 同济大学附属东方医院妇产科,上海 200120)
摘要 目的:探讨缺氧环境下,卵巢癌细胞株SKOV3中HIF-1α、HIF-2α和Syndecan-1的表达及相互作用关系。方法:利用MatInspector在线分析软件,分析Syndecans转录因子结合位点CoCl2诱导缺氧以及HIF)抑制剂雷帕霉素(Rapamycin)HIF-1α、HIF-2α及Syndecan-1基因水平的表达;Western-blot方法检测HIF-1α、HIF-2α蛋白水平的表达。结果:Syndecan-1的转录因子结合位点中有HIFF(低氧诱导因子家族)/HIF保守序列。缺氧时,HIF-1α mRNA(P0.05)HIF-1α蛋白、HIF-2α mRNA和蛋白Syndecan-1 mRNA水平(P0.05)Rapamycin不能抑制CoCl2模拟缺氧条件下HIF-1α的蛋白表达,但能抑制HIF-2α的表达。Syndecan-1mRNA动态变化曲线和HIF-1α和HIF-2α蛋白水平的动态变化曲线一致低氧可诱导HIF-1α和HIF-2α的表达,α、HIF-2α途径增强Syndecan-1的表达。Rapamycin;HIF-1α;HIF-2α
Hypoxia dependent HIF-1α and HIF-2α up regulates the expression of Syndecan-1 in SKOV3 cells XIN Wei-juan1,LI Ting2,ZHAO Xin2,DING Yan1,WU Qian-yu2. 1 Department of Gynecology,Obstetrics and Gynecology Hospital,Fudan University,Shanghai 200032. 2 Department of Gynecology and Obstetrics, East Hospital, Tongji University,Shanghai,200120
【Abstract】Objective:To investigate the expression of hypoxia inducible factor-1α (HIF-1α), hypoxia inducible factor-2α (HIF-2α), and Syndecans-1 , and their relationship during hypoxia in human ovarian cancer cell line SKOV3. Methods:The functions and structures of Syndecan-1 with Matinspector tools. In addition, under hypoxic environments and an exposure to Rapamycin, a suppressor for hypoxia-inducible factors (HIFs), SKOV3 cells were subject to fluorescent quantitative RT-PCR for HIF-1α, HIF-2α and Syndecan-1 genes expressions, to Western-blot for HIF-1α and HIF-2α proteins expressions. Results:There are three HIFF(hypoxia-inducible factor family) /HIF conserved sequences in the Syndecan-1
*通讯作者 Email:xinwj80@126.com
transcription factor binding sites. Under the condition of hypoxia, the expressions of HIF-1α mRNA reduced, HIF-1α protein, HIF-2α mRNA and protein increased ( P0.05). Rapamycin couldn’t inhibit the expression of HIF-1α protein, but could inh
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