紫杉醇类耐药相关分子标记物研究进展-1.ppt

2.1 P-gp p-glycoprotein，是膜转运系统超家族成员之一，定位于细胞膜。P-gp通过水解ATP，以耗能的方式将细胞内药物沿穿膜通道排出胞膜外 2.1 P-gp 紫杉类化疗药物作为P-gp的作用底物之一，编码P-gp的mdr 1 基因扩增，导致P-gp过表达，引起肿瘤细胞内紫杉醇减少，从而产生耐药 2.1 P-gp 通过P-gp拮抗剂竞争性地结合至P-gp表面， 可明显增加耐药肿瘤细胞内的药物浓度， 从而逆转其多药耐药 2.1 P-gp 吉非替尼(Iressa)，肺癌一种靶向药物，是一种表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂，可抑制肺癌细胞表面P-gp的表达，使耐药细胞对紫杉醇和多西紫杉醇敏感性明显增加 2.2 MRP 多药耐药相关蛋白(multidrug resistance-associated protein)，定位于胞浆，具有水解ATP及转运蛋白功能 研究发现，其成员MRP7可促进多西他赛外排而减少细胞内药物浓度，介导肿瘤耐药 3.1 Bcl-2 一种细胞凋亡调节基因，可抑制射线、药物、癌基因等多种原因诱导的凋亡 Bcl-2过表达，可使细胞对紫杉醇产生耐药 性；降低Bcl-2水平可使细胞对紫杉醇敏感 3.2 核因子-κB 是Rel 转换因子家族的成员 研究证明， 在乳腺癌细胞中持续活化的核因子-κB引起抗凋亡基因C-IAP 2和Mn-SOD 过表达，导致肿瘤细胞对紫杉醇的耐药，抑制核因子-κB活性可增加紫杉醇诱导 3.2 核因子-κB 的肿瘤细胞凋亡，提高乳腺癌胞对紫杉 醇的敏感性 前列腺癌细胞也有类似研究结果 3.3 P53 p53是研究最广泛的抑癌基因，存在野生型和突变型。野生型p53可使细胞增殖分裂停止在G期，对DNA复制错误或化疗引起的DNA损伤反应的修复起重要作用，同时p53还可启动受损细胞的凋亡 3.3 P53 研究显示，存在突变p53的卵巢癌细胞系对紫杉醇敏感性增加，而将野生型p53导人人肉瘤细胞株Saso，可降低紫杉醇等药物的肿瘤细胞毒作用 * 萜 tie。[1] Angewni.Chem.Int.Ed.Engl, 1994，33:15-44 紫杉醇说明书 multidrug resistance-associated protein，MRP....。κ 卡帕 包括a、b微管，b微管包括7种亚型 包括a、b微管，b微管包括7种亚型 胃癌、食管癌组织也可 p糖蛋白， mdr基因家族包括1-9， 大部分研究认为紫杉类耐药与mdr表达无关。 包括a、b微管，b微管包括7种亚型 肿瘤科 张召 紫杉醇类抗肿瘤药物 紫杉醇 多西他赛 紫杉醇脂质体 白蛋白结合型紫杉醇 适应症 抗癌活性成分为紫杉烷类二萜及其生物碱 新型抗微管药物，主要通过促进微管蛋白聚合，抑制解聚，保持微管蛋白稳定，抑制细胞有丝分裂，诱导细胞凋亡 体外实验证明紫杉醇具有显著的放射增敏 药理作用 药理作用 作用，可能是使细胞中止于对放疗敏感的G2和M期 耐药机制及分子生物学指标 1. 紫杉类药物靶点及靶点与药物亲和力的改变：β-微管蛋白、微管相关蛋白(tau、MAP)、有丝分裂素(Stathmin) 2. 紫杉类药物在细胞内有效药物浓度的降低：P-糖蛋白(p-glycoprotein，P-gp)、 耐药机制及分子生物学指标 多药耐药相关蛋白(MRP)、肺耐药蛋白、乳腺癌耐药相关蛋白等 药物靶分子下游效应信号途径的异常：Bcl-2、核因子-κB、蛋白激酶-C(PKC)、P53、生存素(survivin)的表达 耐药机制及分子生物学指标 细胞周期的调控：P21、P27 其他，如上皮细胞生长因子受体-2(HER-2)、硫氧化还原蛋白质(thioredoxin)、紫杉醇耐药相关基因-3(TRAG-3)、BRCA-1和BRCA-2 1. 微管蛋白 微管(Microtubules)主要由α，β-微管蛋白异源二聚体及少量微管相关蛋白聚合而成的亚稳定动态结构。α， β-微管蛋白分别有6种 亚型。 1.1 TUBB 基因突变 研究发现，紫杉醇耐药的部分NSCLC患者中β-微管蛋白基因(TUBB )突变，中位生存期较β-微管蛋白基因无突变者显著降低 1.2 β-微管蛋白Ⅲ(TUBB Ⅲ) 通过免疫组化技术，发现紫杉类药物耐药的卵巢癌、乳腺癌、NSCLC、食管癌等组织中，TUBB Ⅲ 亚型水平比非耐药组织明显增高，可达4倍以上。βI、βⅣa型也有所增高。 1.2 β-微管蛋白Ⅲ(TUBB Ⅲ) 体外试验，用反义寡脱氧核苷酸技术使TUBB Ⅲ型表达减少，紫杉醇敏感性明显增加 这些改变的亚型可能是紫杉醇产生高度耐药的作用位点 TUBB Ⅲ作为预测紫杉醇敏感性指标之一 1.3 微管相关蛋白质-tau tau低表达的乳腺癌患者对紫杉醇有较好的疗效 通