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●酶储存缓冲液 ●PCR体系成分 例如:纯化的人类基因组DNA浓度为1 µg/µl,某基因 100 mM KCl, 10 mM Tris-HCl (pH 8.0), 0.1 mM △模板DNA的纯度 在人类基因组中拷贝数为10,其单位体积拷贝数为: 5 EDTA, 1 mM DTT, 0.5% Tween 20, 0.5% NP-40, 很多残留的核酸提取试剂会影响PCR反应,包括蛋白 3.0 ×10 mol/µg × 1 µg/µl × 10 copy/mol 6 =3.0 ×10 copy/µl 0.4%BSA和 50%(v/v) 甘油。 酶、蛋白变性剂(比如SDS、胍盐、苯酚)、高浓度盐(KAc、 4 6 1×10 copy/ (3.0 ×10 copy/µl) = 1/300 µl NaAc、辛酸钠等)和高浓度EDTA等。这些杂质可通过乙 即:1/300 µl浓度为1 µg/µl的人类基因组DNA(3.3 ng)中含 Taq plus DNA Polymerase ●10×Taq plus Buffer 醇或异丙醇沉淀后用66-70%乙醇洗涤两次去除,大部分 10 拷贝该基因,稀释300倍后加1 µl至25 µl PCR体系。 优化的PCR Buffer使PCR具有更高的灵敏

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