HPLC―CAD法同时测定葡萄糖氯化钠注射液中葡萄糖及氯及钠含量.docVIP

HPLC―CAD法同时测定葡萄糖氯化钠注射液中葡萄糖及氯及钠含量 　　【摘要】目的：建立高效液相色谱-电喷雾检测器（HPLC-CAD）法同时测定葡萄糖氯化钠注射液中葡萄糖、氯和钠的含量。方法：采用Thermo U3000-Corona CAD测定，用超纯水溶解葡萄糖氯化钠注射液，过滤后注入液相色谱仪测定。色谱柱为Thermo Mixed-Mode Hilic-1柱（3μm 21×150mm）；柱温：40℃；流动相：50mmol/L醋酸铵和乙腈梯度洗脱；流速：03mL/min；进样体积：10μL。结果：葡萄糖的线性范围为005～100mg/mL（r=09993），氯和钠的线性范围为009～180mg/mL（r=09999）。方法回收率均998%，精密度RSD均 　　2方法与结果 21色谱条件色谱柱：Thermo Mixed-Mode Hilic（21mm×150mm 13μm）；流速：03mL/min，柱温40°C，进样量10μL，流动相为A（50mmol/L醋酸铵）：B（乙腈）。详见表1 22供试品溶液的制备取“12”项下葡萄糖氯化钠注射液，精密移取各1mL分别置于1000mL容量瓶中，加超纯水稀释并定容至刻度，摇匀，滤过，滤液过045μm滤膜，即得 23对照品溶液的制备参照2015年版《中国药典》二部中葡萄糖氯化钠注射液规格（7）项下[1]配制，取葡萄糖125g和氯化钠225g，精密称定，置于250mL量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。作为对照品贮备液 24标准曲线的制备精密移取对照品贮备液1mL置于10mL量瓶中，加超纯水稀释并定容至刻度，摇匀，再精密移取各1mL分别置于100、50、25、10、5mL量瓶中，加超纯水稀释并定容至刻度，摇匀，即得。制成下表所示线性溶液（见表2）。葡萄糖、Cl-、Na+分离度良好，且不受溶剂超纯水中杂质ClO-等干扰，色谱图见图1。精密量取上述“22”和“23”项下供试品溶液和对照品溶液，分别精密吸取10μL，注入液相色谱仪，记录峰面积，以对照品浓度为横坐标，以峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，进行线性回归。葡萄糖在05～10mg/mL范围内与峰面积线性关系良好，回归方程Y=1258386X+ 12101（r= 09993）；氯、钠在009～180mg /mL范围内与峰面积线性关系良好，回归方程分别为Y= 336836X+ 06429（r= 09999）、Y= 173087X+ 00395（r= 09999） 25精密度试验精密精取同一对照品溶液，连续进样6次，记录峰面积，分别计算葡萄糖、Cl-和Na+的RSD，分别为025%、011%、014%。结果表明，仪器精密度良好 25重复性试验取样品6份，按“22”供试品方法制备，测定峰面积。分别计算6份样品中葡萄糖、Cl-和Na+的平均含量，分别为1251g/250mL、225g/250mL、225g/250mL，RSD分别为150%、095%和158%。结果表明，本方法重复性良好 26稳定性试验取样品，在0、4、8、12、16、20、24h内进样，测定峰面积，分别计算样品中不同时间点的葡萄糖、Cl-和Na+含量，RSD为093%、085%、104%。结果表明，供试品溶液在24h内稳定 27回收率试验取已知含量的样品6份，每份约1mL，精密称定。分别精密加入“23”项下对照品储备液1mL，按“22”供试品方法制备，测定，结果见表3。葡萄糖氯化钠注射液中葡萄糖、Cl-和Na+的平均回收率分别为1004%、998%、1001%，RSD分别为111%、102%、115%。见表3至表5 3讨论 31定量方法的选择由于葡萄糖和氯化钠没有紫外吸收官能团，不能通过常规的高效液相色谱-紫外检测法（HPLC-UV）同时进行检测。本文建立了一种准确、快速、简便的高效液相色谱-电喷雾检测器法同时测定葡萄糖氯化钠注射液中葡萄糖、氯和钠的含量，可应用于其质量控制和稳定性研究，对其类似化合物的测定也具有参考价值，也可作为医院常用的葡萄糖氯化钠注射液含量检测的一种有效手段[12-13] 32色谱条件的选择由于Thermo Mixed-Mode Hilic-1 3μm 21×150mm色谱柱具有混合模式固定相结合反相（RP）和亲水性交互（HILIC）两种属性。高效的硅胶基质的混合模式固定相由疏水性烷基链组成，末端是二醇基团。疏水性基团提供反相保留，末端的二醇基团则促进亲水相互作用。其独特组合提供可调节的选择性，卓越的分离度和峰的不对称性，适用于各种极性和非极性分子，使同时测定氯和钠两种阴阳离子成为可能 33CAD?z测器的优势电喷雾检测器（CAD）是近年发展起来的一种新型通用检测器，在灵敏度、重现性和线性方面均具有优异的