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两种多糖对小白鼠机体免疫力效果影响
两种多糖对小白鼠机体免疫力效果影响 摘 要:天然活性多糖对机体没有明显的毒副作用,不但具有免疫调节、抗肿瘤等生物功能,还具有抗炎症、抗氧化等多种生物功能。而在畜禽保健中,植物多糖具有毒副作用小、无残留等优点,属于一种天然的产品。为了比较2种多糖对提高小白鼠机体免疫力效果的影响,本文以枸杞多糖和黄芪多糖为例,对小白鼠进行灌胃,并测试了外周血IgG、IgM含量,同时对其免疫器官指数等也进行了测量,从而以期能够以这种多糖作为功效成分的动物保健品的开发,提供一些质量控制、合理配方和制定质量标准提供科学依据
关键词:枸杞多糖;黄芪多糖;小白鼠;机体免疫力
中图分类号:Q629.12 文献标识码:A DOI:10.11974/nyyjs.20170532004
进入21世纪以来,畜牧养殖业进入了工业化生产中,畜牧养殖业得到了快速的发展。但同时在畜禽中往往无法建立充分的免疫环境,受许多因素的影响,畜禽免疫力下降,预防免疫效果不佳。大量研究认为,多糖及多糖复合物能够参与免疫功能的调节,参与和介导了细胞各种生命现象的调节。而机体的免疫力系统及其免疫应答不但对各种正常生理功能的提高具有重要作用,还对机体的健康成长具有重要作用。根据相关研究表明,枸杞多糖能明显提高小白鼠足跖肿胀度、脾脏生成抗体细胞数等,对小白鼠淋巴细胞增殖能力无显著影响,并且对正常小白鼠的细胞免疫、体液免疫力及巨噬细胞功能都有明显的增强作用。而黄芪含有氨基酸多糖、黄茂皂贰、黄酮类、微量元素等多种生物活性物质,是临床上用于扶正固本的一种常用中药。其中黄芪多糖具有较强的免疫活性,是黄芪的主要药用活性成分。根据相关研究表明,黄芪多糖能显著增大小白鼠脾脏指数、腹腔巨噬细胞指数、胸腺指数,能够显著提高小白鼠的免疫功能,同时还能促进T淋巴细胞增殖。为了比较2种多糖对提高小白鼠机体免疫力效果的影响,本文以枸杞多糖和黄芪多糖为例,对小白鼠进行灌胃,并测试了外周血IgG、IgM含量,同时对其免疫器官指数等也?M行了测量,从而以期能够以这种多糖作为功效成分的动物保健品的开发,提供一些质量控制、合理配方和制定质量标准提供科学依据
1 材料与方法
1.1 试验材料和试验动物
选用了北京生态尔生物科技有限公司生产的黄芪多糖,选用了百瑞元枸杞产业发展有限公司生产的枸杞多糖,黄芪多糖的含量为70%,枸杞多糖的含量为30%。试验动物购自某医科大学实验动物中心,4~6周龄、雄性的ICR小白鼠,小白鼠属于SPT级,共90只,饲养于SPF级屏障环境中,符合国建实验动物饲养及管理条例,并且饲养的时候选用了进口独立通风笼具
1.2 主要试剂和主要仪器
主要试剂购自RD公司,包括小白鼠免疫球蛋白G(IgG),批号为2014-5cx-2014-11AZ免疫球蛋白M(IgG)定量检测卡。主要仪器选自上海安亭科学仪器有限公司生产的离心机;上海科华仪器有限公司生产的酶标仪、自动洗板机;天津泰斯特有限公司生产的电热恒温器;圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司生产的血常规分析仪
1.3 实验动物分组与给药
随机将90只小白鼠分为3组,每组30只,按照体重140mg/kg将小白鼠分为试验组,并进行多糖灌胃,其中,将枸杞多糖灌于A组小白鼠的胃中,将黄芪多糖灌于B组小白鼠胃中;将枸杞多糖和黄芪多样等量复配后灌于C组小白鼠胃中,连续灌胃30d,小白鼠自由采食
1.4 检测指标
1.4.1 检测生长状况及增重率
试验开始前及试验开始后,每隔10d对小白鼠的体重进行测量1次。不但要观察小白鼠毛色、饮食等情况,还要观察小白鼠的精神状况如何和活动情况
1.4.2 血常规检测
在试验开始后,在各组取10只小白鼠,每隔10d对这些小白鼠进行称量体重。屠宰前在小白鼠的尾部,静脉采血20μL,并放置到稀释液中进行分析,分析的时候选用血常规分析仪,不但对白细胞、淋巴细胞的数量进行测定,还要对红细胞数量进行测定
1.4.3 外周血IgG、IgM含量的检测
屠宰前,各组小白鼠要摘眼球采血0.5mL,并且要在室温条件下放置1h。同时为了使血清充分析出,要将凝固血与管壁剥离。收集血清要在2000r/min离心10min,检测的时候选用小白鼠IgG/IgM酶联免疫分析(ELISA)试剂盒
1.4.4 免疫器官指数的测定
小白鼠处死的方法采用脱颈椎方法,为了计算出胸腺指数和脾脏指数,解剖后取出胸腺和脾脏,并分别对小白鼠的尸体进行称重。计算公式为:胸腺或脾脏指数=胸腺重或脾脏重(mg)/体重(g)
2 结果与分析
2.1 血液IgG、IgM含量受枸杞多糖、黄芪多糖及其组合的影响
根据上述试验得出枸杞多糖、黄芪多糖及其组合对血液IgG、IgM含量的影响结果(表1)
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