第六章1分子生物学改造
蛋白质分子的生物学改造 蛋白质在生命现象中具有重要作用,在医药、轻工等行业也具有重要作用,如胰岛素、枯草杆菌蛋白酶等; 天然生物材料中蛋白质含量较少; 基因克隆技术克隆基因,在宿主细胞中可表达特定蛋白质(重组蛋白); 多数天然蛋白质的理化特性不能适应于工业用途; 利用现代分子生物学技术,改变克隆基因中的特定基因,即可表达出适合于商业用途的蛋白质。 在体外,通过碱基取代、插入或缺失的方法,使基因DNA序列中的某个特定碱基发生改变,从而改变蛋白质的结构,称为蛋白质工程。 通过蛋白质工程,人们可以随心所欲地改变蛋白质的结构及其理化性质和生物学功能。例如,我们可以利用蛋白质工程改变酶的Km、Vmax,酶促反应的最适温度、最适pH值、酶促反应的特异性以及酶蛋白的稳定性等。 蛋白质工程的主要技术之一是定点突变技术. 一、定点突变 利用分子生物学技术,在体外通过碱基取代、插入或缺失可以使基因DNA序列中任何一个特定的碱基发生改变。这种体外特异性改变某个碱基的技术,称谓定点突变(site directed mutagenesis)。 定点突变具有简单易行、重复性高等优点,现已发展成为基因操作的一种技术。这种技术不仅适用于基因结构与功能的研究,还可通过改变基因的密码子来改造天然蛋白质。 二、基因定点突变的意义 用于研究基因的结构与功能; 通过改变基因的密码子来改造天然蛋白质,使其更符合人们的需要。如
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