药物制剂微生物检验—培训课件.pptVIP

三、控制菌检查－检查流程 供试品 增菌培养 分离培养 纯培养 染色镜检 生化反应试验 报告结果 三、控制菌检查－检查流程 1.增菌培养目的 使被检药物中的被检菌增殖，避免出现漏检。 三、控制菌检查－检查流程 2.分离培养目的 经增殖培养后,被检菌大量繁殖，同时其他一些杂菌也出现增殖。因此分离培养能使目的菌从混合菌中分离出来。 三、控制菌检查－检查流程 3.纯培养目的 只是大量增殖被检菌，用于后面的进一步检验。 三、控制菌检查－检查流程 4.染色镜检目的 初步鉴定，观察细菌的形态大小。 三、控制菌检查－检查流程 5.生化试验目的 最终的鉴定依据，结合染色镜检得出实验结果，填写检验报告。 三、控制菌检查－大肠埃希菌检查 ★大肠埃希菌 俗称大肠杆菌，属肠杆菌科埃希菌属，革兰阴性杆菌，兼性厌氧菌，能发酵多种糖产酸产气。 三、控制菌检查－大肠埃希菌检查 ★大肠埃希菌检查意义 大肠埃希菌为条件致病菌，当人体免疫力低下或是侵入肠外组织、器官，可引起肠外感染，乃至败血症。也可随人和动物的粪便排出体外，污染环境，一旦食品、药品、水等物品中检出该菌，说明已受粪便污染，可能存在其他肠道致病菌和寄生虫卵，人们饮用或服用它们则可能引起消化道传染病。 三、控制菌检查－大肠埃希菌检查 书写检验 记录单 双阳或双阴性 增菌培养 供试液的制备 检查结果判断 配培养基和稀释液 靛基质试验 荧光检查 一阴 一阳 分离纯化 最终结果判断 ★大肠埃希菌检查流程图 胆盐乳糖M 蓝白萤光 玫瑰红色液面 EMB琼脂/麦康凯琼脂平板 菌落特征→革兰染色、镜检 →生化试验:乳糖发酵试验、IMViC试验 乳糖胆盐培养基 伊红美蓝琼脂培养基 靛基质试验 气泡，培养基呈黄色 紫黑色金属光泽 玫瑰红色液面 麦康凯琼脂培养基：大肠杆菌呈桃红色。 大肠埃希菌 产气杆菌 I M Vi C试验 大肠埃希菌 +(或-） + - - 产气杆菌 - - + + 吲哚（靛基质） 甲基红 二乙酰 枸橼酸盐利用 三、控制菌检查－大肠埃希菌检查 ★大肠埃希菌检查结果报告 检出大肠埃希菌 MUG阳性，靛基质阳性 MUG阳性，靛基质阴性，IMViC为－＋－－，G- MUG阴性，靛基质阳性，IMViC为＋＋－－，G- MUG阳性:紫外光下 管内培养物呈现 蓝白色荧光 三、控制菌检查－大肠菌群检查 ★大肠菌群检查意义 大肠菌群主要存在于温血动物粪便中，随粪便排出体外后可直接污染药品，若产品中检出该菌群，表明该产品受到粪便污染，可能存在肠道致病菌并引起疾病，以此作为粪便指示菌比大肠埃希菌更具广泛卫生学意义。 三、控制菌检查－大肠菌群检查 产酸：黄色 产气：气泡 产酸产气 书写检验 记录单 不产酸不产气 增菌培养 供试液的制备 配培养基和稀释液 检查结果判断 30-35℃ 18-24h 分离培养 乳糖发酵验证试验 最终结果判断 30-35℃ 24-48h 特征菌落 36±1 ℃ 18~24h 胆盐乳糖M 产酸：黄色 产气：气泡 紫黑色/桃红色 ★大肠菌群检查流程图 EMB琼脂/麦康凯琼脂平板 三、控制菌检查－大肠菌群检查 ★大肠菌群检查结果报告－大肠菌群MPN表 根据发酵乳糖产酸产气，平板上有典型菌落，并经证实为革兰氏阴性短杆菌，靛基质试验阳性，则可报告被检样品中检出粪大肠菌群。 各供试品量的检出结果 最可能的大肠菌群数N （个/g或ml） 1.0g或1.0ml 0.1g或0.1ml 0.01g或0.01ml + + + ＞102 + + - 10＜N ＜102 + - - 1＜N＜10 - - - ＜1 三、控制菌检查－铜绿假单胞菌检查 ★铜绿假单胞菌 铜绿假单胞菌属于假单胞菌属，为革兰氏阴性杆菌，氧化酶阳性，能产生绿脓菌素。此外还能液化明胶，还原硝酸盐为亚硝酸盐，在42℃±1℃条件下能生长。 三、控制菌检查－铜绿假单胞菌检查 ★铜绿假单胞菌检查意义 铜绿假单胞菌在特殊情况下可引起皮肤化脓感染、泌尿道感染、中耳炎等。外伤及烧伤患者感染后最易引起化脓，并引起败血症。为保证消费者安全，化妆品中不得检出铜绿假单胞菌。 三、控制菌检查－铜绿假单胞菌检查 最终结果判断 增菌培养 供试液的制备 书写检验 记录单 分离纯化 无菌落或无特征菌落 配培养基和稀释液 革兰染色、镜检→ 氧化酶试验 绿脓菌素试验 生化试验 硝酸盐还原试验 42℃生长试验 明胶液化试验 ★铜绿假单胞菌检查流