AMPK自噬通路在骨髓间充质干细胞心肌保护中的作用及机制研究.ppt

AMPK/自噬通路在骨髓间充质干细胞心肌保护中的作用及机制研究 vivian * 内容简介： 祖细胞可通过多种效应起到对受损心脏的修复作用，是现流行的一种治疗心脏疾病的有效方法。其作用机制涉及自噬过程，本文对自噬发生过程涉及的各个环节做了详细的说明，以及总结了目前研究自噬的方法。 1. 骨髓间充质干细胞（BMSCs）在治疗心脏疾病中的作用 * 祖细胞治疗心脏病变 EPCs Bone Marrow MSCs HSCs Heart Resident cardiac stem cells Liver Skeletal Muscle Adipose Tissue Stem Cells Endothelial cells Cardiomyocytes Heart repair MSCs Trophic factors HGF、G/M-CSF、VEGF、IGF-2 reducing tissue injury inhibiting fibrotic remodeling promoting angiogenesis stimulating recruitment and proliferation of stem cells reducing inflammatory oxidative stress 2. 自噬与心脏的关系 * CM：cardiomyocytes 心脏疾病病变 凋亡 自噬 * 自噬（autophagy）是继凋亡后，当前生命科学最热的研究领域。比利时科学家Christian de Duve在上世纪50年代通过电镜观察到自噬（autophagosome）结构，并且在 1963 年溶酶体国际会议上首先提出了“自噬”这种说法。Christian de Duve被公认为自噬研究的鼻祖，他也因发现溶酶体，于1974年获得诺贝尔奖。 自噬背景 * 自噬基因（autophagy-related gene，ATG）的克隆始于酵母（yeast）。第一个酵母自噬基因（ATG）于1997年被日本科学家Yoshinori Ohsumi小组克隆，命名为Atg1。 第一个哺乳动物自噬基因于1998年被美国科学家Beth Levine小组克隆，命名为Beclin 1。截止到2010年9月已经克隆34个ATG基因。 背景 * 目前自噬最前沿的三个领域： 1）自噬体膜的来源问题 2）细胞器自噬，特别是线粒体自噬（mitophagy） 3）Beclin 1复合物的形成和调控蛋白以及mTOR信号通路在自噬中的作用 背景 * 自噬过程 * class III phosphatidylinositol 3-kinase/Vps34 and Beclin 1(Atg6) complex isolated memberance recruiting Atg proteins two ubiquitin-like protein conjugation pathways Atg12-Atg5 Atg8/LC3-PE Atg 16L Atg12-Atg5-Atg16L Atg5-dependent localization elongation autophagosome Autophage activited Atg调控机制 * Atg12首先由E1样酶Atg7活化，之后转运至E2样酶Atg10，最后与Atg5结合，形成自噬体前体（Autophagosomal precursor）。 * 哺乳动物LC3前体合成之后，在Atg4同源物的催化下，形成可溶性形式LC3称为LC3-I，定位于胞浆中。之后，LC3-I在哺乳动物E1泛素样酶Atg7和E2泛素样酶Atg3的催化下，与自噬泡膜表面的磷脂酰乙醇胺（PE）结合，称为LC3-II。 * Atg12-结合和LC3-修饰两条泛素样修饰过程相互偶联。 Atg10和Atg3两种E2样酶在调控autophagy上述两条泛素样修饰过程中发挥重要作用。 Atg5是自噬的限速调控步骤，其过表达可增强自噬。Atg12泛素样结合位点赖氨酸130的突变可显著降低Atg5功能。 LC3-II的形成依赖于Atg12-Atg5复合物：在Atg5-/-的胚胎干细胞或表达结合缺陷型Atg5基因（Atg5K130R）突变株的胚胎干细胞中，LC3-II是检测不到的 。 * Autophage in heart no stress basal levels mild stress enhanced severe stress excessive/ long-term upregulated beneficial beneficial harmful autophage