人类X染色质观察.pdfVIP

实验十实验十 人类人类X-染色质的观察染色质的观察 实验十实验十 人类人类 染色质的观察染色质的观察 （（X-Chromatin）） （（ ）） 陈宗礼 齐向英 一、一、实验目的实验目的 一一、、实验目的实验目的 初步掌握X-染色质标本的制作方法； 识别人类细胞X-染色质的形态特征及所在位 置，为进一步研究人体染色体的畸变与疾病提 供参考条件。 二、二、实验原理实验原理 二二、、实验原理实验原理 1949年Barr等发现，在雌猫的神经细胞核内 有一个浓缩的深染小体，在雌性的细胞中没 有。后来了解，在雌体细胞中的两条X-染色 体在间期是有一条，（或这条的大部分）处 于凝集而不活动状态，从而形成了这种X-染 色质 （或称性染色质，Barr’s body）后来进 一步发现。在所有哺乳动物的细胞中广泛从 在。 二、二、实验原理实验原理 二二、、实验原理实验原理 X-染色质是异染色质化的失活的X-染色体， 普遍存在于哺乳类雌体细胞中。人类在女性 两个X染色体中，有一个是失活的呈异固缩 状态 （不包括胚胎发育早期及配子形成的时 期）。在间期核表现为深染的X-染色质。正 常情况大小约为1-1.5mm，频率在13-39%左 右，而在正常男性个体中缺乏这种现象 （0- 2%）。因而通过X-染色质的检查可鉴别胎儿 性别，并为判断性染色体异常引起的遗传病 提供参考资料。 三、三、实验材料实验材料 三三、、实验材料实验材料 口腔黏膜细胞或发根细胞。 四、四、实验器具和药品试剂实验器具和药品试剂 四四、、实验器具和药品试剂实验器具和药品试剂 1. 器具：显微镜，洁净的载片和盖片，压 舌板，刮片或牙签，吸水纸。 2. 试剂 ：95%乙醇，5%醋酸，2%乳酸醋酸地 衣红。 五、五、实验内容和步骤实验内容和步骤 五五、、实验内容和步骤实验内容和步骤 （一）口腔颊部黏膜细胞涂片的制备： 1. 取材：涂片用清洁灭菌的边缘光滑的载 片（或适当的刮片或牙签），在口腔两颊部 刮取上皮黏膜细胞，弃去第一次刮取物，再 在口腔颊部轻轻刮取一次，将刮取的健康的 上皮细胞在干净的载片中央轻轻地涂一层， 每次可涂1-3片。 2. 固定 ：不让涂片干燥，应立即入95%乙醇 固定30分钟，空气干燥，使其牢固附着在载 玻片上。 五、五、实验内容和步骤实验内容和步骤 五五、、实验内容和步骤实验内容和步骤 3. 水洗 ：用蒸馏水冲洗两次，用吸水纸吸 去剩余水分。 4. 染色压片 ：稍干后滴加1-2滴2%乳酸醋酸 地衣红，室温下染色20-30分钟，勿使干 燥，然后加盖片复以吸水纸，用手指轻度加 压后待检。 五、五、实验内容和步骤实验内容和步骤 五五、、实验内容和步骤实验内容和步骤 （二）毛发根部细胞涂片的制备： 1. 取材：拔取一根带有毛根的头发，自基 部截取2cm左右置载片上。 2. 预染 ：在毛根部加一滴地衣红染液预染 片刻。 五、五、实验内容和步骤实验内容和步骤 五五、、实验内容和步骤实验内容和步骤 （三）观察--X-染色质的辨认 ：