优质课菊花的组织培养.ppt

2、植物组织培养的基本过程 请你演示接种过程 课题延伸（略） 练习 1.答：植物组织培养所利用的植物材料体积小、抗性差，对培养条件的要求较高。用于植物组织培养的培养基同样适合于某些微生物的生长，如一些细菌、真菌等的生长。而培养物一旦受到微生物的污染，就会导致实验前功尽弃，因此要进行严格的无菌操作。 2.答：外植体的生理状态是成功进行组织培养的重要条件之一。生长旺盛的嫩枝生理状况好，容易诱导脱分化和再分化。 * 一、植物组织培养的基础知识 1、植物组织培养的条件 当植物细胞脱离了原来所在植物体的器官或组织而处于离体状态时，在一定的营养物质、激素和其他外界条件的作用下，就可能表现出全能性，发育成完整的植株 ①必要条件： 植物体的器官、组织、细胞必须处于离体状态 一定营养物质、激素和其他外界条件 植物组织培养的相关概念 （1）脱分化： 由 的植物组织或细胞 产生 的过程。 （2）愈伤组织（特点）： 细胞排列 而无规则，是一种 的呈 的 。 （3）再分化： 脱分化产生的 继续培养， 重新分化出 或 等器官的过程。 （4） 植物组织培养的理论基础： 植物细胞的 。 高度分化 愈伤组织 疏松 高度液泡化 无定形状态 薄壁细胞 愈伤组织 根 芽 全能性 (6)细胞分化的概念：植物的个体发育过程中，细胞在形态、结构和生理功能上都会出现 ，形成这些差异的过程叫 分化。 稳定性的差异 细胞 细胞分化的原因： 基因选择性表达的结果 （5）细胞的全能性 具有某种生物全部遗传信息的任何一个细胞。都具有发育成完整生物体的潜能 原因： 生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质，都有发育成为完整个体所必需的全部基因 二、影响植物组织培养的因素 1．内部因素（外植体） 不同的植物组织，培养的难易程度_________；同一种植物材料，材料的年龄、保存时间的长短等也会影响实验结果。 差别很大 2．外部因素 (1)营养成分：常用的一种培养基是___________，主要成分包括：____________，如N、P、K、Ca、Mg、S；__________，如B、Mn等；有机物，如甘氨酸、维生素、蔗糖等。 MS培养基 大量元素 微量元素 菊花的组织培养一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝，因为这种嫩枝生理状态良好，易诱导脱分化和再分化。 讨论：你能说出各种营养物质的作用吗？同专题2中微生物培养基的配方相比，MS培养基的配方有哪些明显的不同？ 微生物培养基以有机营养为主。与微生物的培养不同，MS培养基则需提供大量无机营养，无机盐混合物包括植物生长必须的大量元素和微量元素两大类。 微量元素和大量元素提供植物细胞生活所必需的无机盐； 蔗糖提供碳源（也作为能源），同时能够维持细胞的渗透压 甘氨酸、维生素等物质主要是为了满足离体植物细胞在正常代谢途径受到一定影响后所产生的特殊营养需求。 (2)植物激素：启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素是________和______________，二者的浓度、使用的先后顺序及用量的比例等都会影响实验结果。 生长素 细胞分裂素 使用顺序 实验结果 先使用生长素，后使用细胞分裂素 有利于细胞分裂，但不利分化 先使用细胞分裂素后使用生长素 细胞既分裂、也分化 同时使用 分化频率高 使用比例 实验结果 生长素＞细胞分裂素 利于根的分化，抑制芽的分化 生长素＜细胞分裂素 利于芽的分化，抑制根的分化 生长素=细胞分裂素 促进愈伤组织的生长 激素的浓度也对植物组织培养有影响 例如：生长素过多植物会产生另一种植物激素，乙烯，它会抑制植物的生长。 注意:不是所有外植体都要添加植物激素，菊花嫩枝的组织培养不需要添加植物激素 (3)其他因素：________________等 pH、温度、光照 三、实验操作 （一）制备MS固体培养基: 1、配制各种母液： 注意：配制时应先根据要配制的培养基的体积和各种母液的浓缩倍数 MS培养基包括20多种营养