替米沙坦对糖尿病肾病的干预作用及其对Ⅰ 型1，4，5三磷酸肌醇受体表达的影响.pdfVIP

摘要 对糖尿病肾病的干预作用及其对 ，5．三磷酸肌醇受体表达的影响 硕士研究生刘威 导 师刘章锁教授 郑州大学第一附属医院肾内科 郑州450052 摘 要 背景与目的： 糖尿病肾病(DKD)是糖尿病的慢性并发症，并且是当今终末期肾脏病的 重要原因。糖尿病。肾病的发病机制尚未完全清楚。三磷酸肌醇受体(IP3R)是 一种跨膜蛋白，当三磷酸肌醇(IP3)与IP3R结合后，开放钙通道，使内质网中 钙池的Ca2+释放进入胞浆，可调节多种细胞因子、调节因子、效应因子，广泛 参与细胞的生理活动。本实验采用链脲佐菌素(STZ)制造糖尿病肾病大鼠模 型，并使用替米沙坦干预，旨在观察糖尿病肾病大鼠各项生化指标的改变；免 疫组化测定肾脏I型1，4，5．三磷酸肌醇受体(IP3R)蛋白在肾小球系膜细胞和血 管平滑肌细胞内的定位、表达；RT-PCR测定IP3RmRNA水平的变化以及替米 沙坦干预后的变化，探讨IP3R在糖尿病肾病发病机制中的作用。 方法： 雄性SD大鼠30只随机分为三组，即正常对照组(C，以=10)、糖尿病肾病组 链尿佐菌素(STZ)以60mg／kg一次性单侧腹腔注射制备糖尿病肾病大鼠模型， C组动物注射等量的缓冲液。稳定3天后尾静脉采血测定血糖，将血糖大于 16．7mmol／L，为DM模型动物造模成功。普通饮食继续喂养3周，用金属代谢 笼收集24小时尿液后，用磺基水杨酸法，并行空白对照测定24小时尿蛋白排 摘要 泄量．当24小时尿蛋白定量，30mg时确认DKD大鼠模型成功。造模后T组大 鼠给予替米沙坦混悬液按40mg／kg·d一次性灌胃，C组和D组大鼠给予同等体 积蒸馏水灌胃，8周后收获动物。测体重，血糖、血肌酐、血浆白蛋白、血脂： 收集24小时尿标本进行尿蛋白定量；肾脏称重，肾组织进行石蜡切片、HE染 色、免疫组织化学法测定I型IP3R在肾小球系膜细胞、血管平滑肌细胞的定位、 表达；RT．PCR测定mRNA的变化。 结果： 1．糖尿病肾病大鼠动物模型成功后，C组、D组、T组大鼠的血糖分别为 各组比较，差异有统计学意义(均P0．05)；C组、D组、T组大鼠的血浆白 统计学意义(均P0．05)；C组、D组、T组大鼠的24小时尿蛋白分别是 0．05)；C组、D组、T组大鼠的肾重指数(右。肾重／体重)分别为3．26=t：0．47，． 3．78-4-0．28，3．62+0．33，各组比较，差异有统计学意义(均P0．05)。 2．免疫组化显示I型IP3R主要分布于肾小球系膜细胞和血管平滑肌细胞的 胞浆内。在大鼠肾组织切片中，C组大鼠I型IP3R免疫组织化学染色阳性细胞 百分比为24％士3％，D组大鼠I型IP3R免疫组织化学染色阳性细胞增加(阳 性细胞百分比为65％士5％)，T组大鼠I型IP3R免疫组织化学染色阳性细胞降 低(阳性细胞百分比为43％士4％)，各组比较差异有统计学意义(均P0．05)。 3．RT-PCR结果示C组大鼠I型IP3RmRNA的灰度比为0．38+0．03，D组大 mRNA的灰度比 鼠I型口3RmRNA的灰度比为O．75+0．08，T组大鼠I型IP3R 为0．61+0．05，各组比较，差异有统计学意义(均P0．05)。 结论： 1．I型l，4，5．三磷酸肌醇受体主要分布于肾脏肾小球系膜细胞和血管平滑 肌细胞的胞浆内。2．在糖尿病肾病发病过程中，。肾脏I型1,4，5．三磷酸肌醇受体 II 摘要 表达增强。3．采用替米沙坦干预后可以减少I型IPsR在肾脏表达， 尿病微量白蛋白尿的发生、进展及改善各项生化指标，延缓DKD 终末期肾脏病。 关键词： 糖尿病肾病 受体 l，4，5．三磷酸肌醇替米沙坦