炮制对五味子中活性成分的影响及其测定方法的研究.pdfVIP

摘 要 五味子（Schisandra chinensis）做为传统中药已经应用千年的历 史了，主要的活性成分是木脂素类和三萜类化合物，具有明显的保肝， 抗肿瘤，抗病毒的药理作用。不同的炮制方法会改变化学成分和药理 作用，木脂素和三萜类是五味子中的主要活性成分, 而同时测定木脂 素和三萜类鲜为研究。本文采用正反相硅胶柱色谱法、Sephadex LH-20 柱色谱法、制备高效液相色谱法、制备薄层色谱法等对五味子 石油醚、乙酸乙酯萃取物进行了分离纯化，并对分离得到的单体化合 1 物用 H-NMR、ESI-MS 等方法进行结构鉴定。本实验采用清炒、清 蒸、蜜蒸、酒蒸、醋蒸对五味子进行炮制，通过抗氧化活性实验考察 炮制品的活性，并用 HPLC 建立了一种同时测定木脂素和三萜类成分 含量的方法，对比了不同炮制品方法对主要成分含量和抗氧化的影响 并研究了主要单体化合物的抗癌活性。 从五味子石油醚萃取物分离得到 8 个化合物，鉴定出 7 个化合物， 分别是 d-表加巴辛（1）、安五脂素（2）、machilin G（3）、襄五脂素 （4）、表安五酸（5）、谷甾醇（7）、五味子甲素（16）。从五味子乙 酸乙酯萃取层分离得到 8 个化合物，鉴定了其中的 7 个化合物，它们 分别是五味子醇甲（8）、5 - 羟甲基 - 2 - 糠醛（9）、原儿茶酸（10）、 胡萝卜苷（11）、柠檬酸 -1 - 甲酯（12）、柠檬酸二甲酯（13），柠檬 酸（14）。其他单体化合物正在鉴定中。 通过 HPLC 法对不同炮制方法的五味子进行有效成分的含量测 定，并考察了有效成分与抗氧化活性的线性关系。不同的炮制方法能 够改变五味子的活性成分含量和抗氧化活性。其中清炒五味子的总木 脂素的增加最为明显，清除自由基活性（DPPH）的半数抑制率为 0.42 mg/ml，而蜜制的含量最少。生品和清炒中的安五脂素的含量明显要 高于其它炮制方法，而表加巴辛的含量是酒蒸，醋蒸，蜜蒸五味子中 的含量高.五味子经过清炒后，表加巴辛，安五脂素，安五酸的含量 有了明显的增加，而酒蒸会使襄五脂素的含量有所减少。本文研究为 炮制五味子的质量控制有重要的意义。 关键词： 五味子 木脂素和三萜 有机酸 抗氧化 炮制 ABSTRACT Schisandra chinensis, in which lignan and triterpenenoid are the main bioactivie components such as anti-inflammatory, anti-HIV, hepatoprotective activity, are used as traditional Chinese medicine for thousands of years. Different processing method might change the chemical and pharmacological properties. However, most of the studies were focused on the lignan and no report the change of triterpenoid in Schisandra chinensis processed. The contents of six compounds and DPPH radical scavenging activities of the ethanol extract were compared in raw and processed Schisandra chinensis. Eight compounds were isolated from petroleum ether extract, seven of which