华东师范大学学报(自然科学版)61515.pdfVIP

维普资讯 第 1期 华东师范大学学报 (自然科学版) No 1 1999年 3月 JournalofEastChinaNormalUniversity(NaturalScience) Mar 1999 Lfjf— I口， 环境 因子对青海弧菌生长和发光的影 响 郑敬民赵曙霞v朱文杰杨笃才景奉香Q7弓Z／ — — (军 生物系 上海 200062) 提要 该文采用 了多因子正交试验与单因子试验相结合的方法研究 了环境 因子对青 {每弧苗生 长和发光的影响。发现各因子对青海弧苗的生长和发光的影响程度是不同的。其中甘油对生 长的影响最大，而对发光的影响最大的却是氪源。根据各因子的影 响情况，本文提出了有利于 青海弧苗生长和发光的较好的培养基配方及培养的温度条件，井试着对环境 因子对青海疆菌生 长和发光的影响机制作了一些讨论。 关键词 ． 叁 塑堕 塞堂苎堕 垩．茎苎兰 帽髅～ 粥 长 谠因孑 青海弧菌(Vibrloqinghaienslssp．nov)是我们实验室发现并命名的到 目前为止世界上 发现的唯一行独立生活的淡水发光菌[Il。与现在 已教广泛应用的海洋发光菌相 比，它对 Na 的要求很低，适应的温度和 pH 范围都较海洋发光菌宽 ，因而显示出了广阔的应用前 景。青海弧菌的开发利用，首先需要确定它生长和发光的最适环境和营养条件 。本文报道 不同温度、pH、无机盐和氮源、甘油含量对青海弧菌生长和发光的影响。 l 材料和方法 1．1 固体培养基 ：采用朱文杰 的 I号培养基L1J 1．2 菌的培养 ：先以固体斜面培养基 24小时培养传代二次以活化细菌。然后用生理盐水 从第二代斜面上洗下菌苔制成 l08／ml的浓菌液，以每瓶(含 120ml液体培养基)接种 lml， 置转速为 180rpm 的摇床不同温度恒温培养。 1．3 实验设计 ：多因子试验采用正交试验法安排试验；单因子试验和多因子试验相结合。 其中多因子试验安排为：氮源、pH、CaSO4、温度、Mg2、甘油、KBr分别称为因索A、B、C、 D、E、F、G，各取二个水平，选用 (27)正交表安排实验。由于培养液的OD值与其 中的菌 量成正相关，我们选用了oD值作为生长指标；又 由于菌的发光强度与菌体 内荧光酶的活性 成正相关_2 J，故发光 曲线峰的宽度反映 了菌体 内维持高水平荧光酶活性的时间长短，即反 映了菌体 内荧光酶活性水平的稳定性。所 以，我们选用了发光 曲线的峰高和峰宽度共 同作 为反映菌 内荧光酶活性情况的指标。 l_4 生长情况的测定 ：以721分光光度计于 600nm从接种开始每隔 2小时测定培养液的 OD值 (以空 白培养基作对照)，并以oD值对时间作生长 曲线。为了便于测定 ，菌液统一稀 。国家 自然科学基金资助课题 (No 上海市科委也部分资助(No 952312【】11)。 车文于 1996年 l2月收刊。 第一作者；男 。1967年生，博士。 维普资讯 第 1期 郑敬 民荨 ：环境因子对青海蓖菌生长和发光的影响 99 释 20倍后再测定 。 1．5 发光测定 ：以FG一3OO发光光度计测定发光强度 (电流值 )。从接种开始后即开始测 定 ，每隔2小时一次。测定时 ，菌液不稀释，温度为 25℃，以实测 的电流值 比OD值为发光 强度 ，作发光强度一时间关系曲线。