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肝癌患者淋巴细胞与肿瘤细胞化疗药物敏感试验的相关性研究.pdf

河 北 中 医 药 学 报 2008年 第23卷 第1期 · 46 · JOURNAL OF HEBEI TCM AND PHARMACOLOGY V01.23 No.1 .2008 肝癌患者淋巴细胞与肿瘤细胞化疗药物 敏感试验的相关性研究* 秦皇岛市中医院 付晓华 张 敬 李作生 洪月光 吕炳涛 (秦皇岛 066000) 提要 目的:探讨肝癌患者体外淋巴细胞与肿瘤细胞对化疗药物敏感性的关系。方法:采用M1’r 法体外药敏试验,检测了38例肝癌患者外周血淋巴细胞和肿瘤细胞对12种临床常用化疗药物的敏感 性。结果:肝癌患者外周血淋巴细胞对顺铂、表阿霉素等9种化疗药物的敏感性与肝癌肿瘤细胞的药 敏结果有相关性。而对5一氟尿嘧啶、丝裂霉素、阿霉素等3种化疗药物的敏感结果无相关性。结论: 肝癌患者某些化疗药物可以应用外周血淋巴细胞代替肿瘤细胞进行体外化疗药物敏感试验检测,筛选 敏感药物进行个体化化疗。 关键词 MTF法;化疗药物敏感试验;淋巴细胞;肿瘤细胞 中图分类号:R 273 文献标识码:A 文章编号:1007—5615(2008)01—0046—02 肝癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一,发病率和 1.2 化疗药物 试验所用药物均为临床常用化疗药 死亡率均高。许多病人确诊时已失去手术机会,进行 物:顺铂 (CDDP)、5一氟尿嘧啶 (5一Fu)、阿霉素 个体化治疗、降低化疗的盲目性至关重要。用肝癌患 (ADM)、表阿霉素 (eADM)、羟基喜树碱 (HCPT)、 者外周血淋巴细胞和手术切除标本原代癌细胞对临床 丝裂霉素 (MMC)、草酸铂 (LOHP)、足叶乙甙 (VV一 常用化疗药物敏感性进行测定,探讨两者的相关性, 16)、吉西他滨 (GEM)、长春新碱 (vca)、异环磷酰 提高外周血淋巴细胞对化疗药物的敏感性预测的准确 胺 (ICTX)、甲氨喋呤 (MTX)。用生理盐水配制成100 性,指导肿瘤化疗个体化、减少化疗用药的盲目性, 倍储备液,分装贮存于一2O℃冰箱中。 提高疗效,减轻化疗毒副反应,解决肝癌患者化疗用 , 3 试剂 四甲基偶氮唑盐 (MTF,美国Sigma公 药个体化问题。对于失去手术机会的晚期肝癌患者、 司产品),RPMI1640培养液 (内含 10%灭活小牛血清 术后化疗耐药的患者、术前新辅助化疗的患者等无法 及青霉素、链霉素),二甲基亚砜 (DMS0),淋巴细胞 获得肿瘤组织,可以用患者的外周血淋巴细胞代替肿 分离液,台盼蓝,小牛血清。 瘤细胞进行药敏试验,作为肝癌患者化疗用药的参考 2 方法 依据,具有重要意义。因此我们对38例肝癌患者的肿 2.j 单细胞悬液制备 肝癌组织标本均取自手术切 瘤细胞和外周血淋巴细胞分别采用MTF法检测其对 12 除的新鲜癌组织,选取无坏死部分,尽量剔除纤维组 种常用化疗药物的敏感性,以期阐明二者之间是否存 织,投入盛有 RPMI1640液的培养瓶中,在超净台上用 在关联。 PBS液洗涤2—3次后,采用机械法获取肿瘤单细胞悬 1 材料 液,悬于RPMI1640培养液中,经台盼蓝染色进行活细 1.1 标本 选择经手术治疗并经病理确诊的原发性 胞计数 并调整细胞数为5×1 o5/mL。用淋巴细胞分 肝癌患者38例,其中男3O例,女8例,年龄4O~58 离液从外周静脉血中分离淋巴细胞,同法置于RP— 岁,平均47岁,术前未经化疗。于术前采取外周静脉 MI1640培养液中,并调整细胞数为5×1 o5/mL【 。 血,术中切取手术切除的新鲜肝癌组织。 2.2 检测 将癌细胞悬液和淋巴细胞悬液分别

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