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家兔肠缺血/再灌注损伤 Ischemia-reperfusion Injury in Rabbit (I/R) 【理论复习】 缺血再灌注损伤的定义 缺血再灌注与缺血再灌注损伤的区别 影响缺血再灌注损伤发生的因素 缺血再灌注损伤的发生机制 掌握缺血再灌注损伤模型的复制,比较缺血损伤和缺血再灌注损伤的区别 观察缺血再灌注损伤的表现,理解缺血再灌注损伤发生的机制 【实验动物】 家兔(性别、体重) 【实验设计原理】 通过肠系膜上动脉结扎,即SMAO(Superior Mesentery Artery Occlusion)来阻断部分 肠的血液供应一段时间后再恢复血流灌注, 以复制肠缺血/再灌注损伤的动物模型,探 讨缺血/再灌注损伤的发生机制 Ⅰ组:持续缺血组 结扎肠系膜上动脉 2h Ⅱ组:再灌损伤组 结扎肠系膜上动脉 1h,再恢复血流 1h 【实验方法与步骤】 1. 称重 2. 全麻(耳缘静脉注射3%戊巴妥钠1ml/kg) ★注意:从耳缘静脉的远心端开始注射, 排尽气泡,速度不宜太快 ★麻醉效果:角膜反射 基本消失,钳夹家兔 大腿肌肉无反应 3. 仰卧固定(背部交叉)、备皮 颈部正中(甲状软骨下缘→胸骨上切迹) 腹部正中(剑突下1.5cm起向下5cm) ★注意:平贴皮肤剪毛,勿拎起皮肤! 4.颈部正中切口行动脉插管 切口范围:颈部正中,甲状软骨下缘→胸骨上切迹,长约5cm 【插管的注意事项】 插管内事先应加入少量肝素以防凝血;排净气泡,记录前应关闭三通管 插管易滑脱,应双线固定,结扎牢靠 勿使插管尖端与血管壁形成角度,避免刺破血管 5.腹部正中切口: 腹正中线自剑突下1.5cm起向下做5cm切口 ※6.寻找肠系膜上动脉: 将家兔腹腔内脏左移,找到齐右肾门对侧垂直向腹主动脉分出的肠系膜上动脉,穿双线备用 肠系膜上动脉示意图 1. 移动内脏时,动作要轻柔 2. 分离肠系膜上A时需小心细致,不要使用锐利器械,以免损伤血管造成大出血 3. 肠系膜上A夹闭要彻底,缺血再灌注组结扎时注意垫橡皮管,恢复血流灌流(复流)要完全 6.分组进行试验并记录以下指标 【结果分析】 各组的模型复制是否成功? 缺血-再灌注血压变化的机制是什么? 各组动物指标变化的机制是什么? 1、实验目的 2、实验原理 3、实验仪器,药品,动物 4、实验分组和步骤 5、实验结果和讨论 6、实验结论 * * 中南大学病理生理学教研室 【目的要求】 【实验分组】 分离左侧颈总动脉:胸骨舌骨肌与胸锁乳突肌之间深面的颈动脉鞘内,与 气管平行,颜色鲜红、 较细、触之有搏动感, 长约2-3cm,穿线备用 注意:(1)钝性分离 (2)辨清颈A鞘内的血管神经 血管插管 先结扎远心端,后夹闭近心端,剪口部位尽量靠近远心端,成45度角朝向近心端剪一小口,约为管径的1/3-1/2,插管方向朝向近心端,插入1-1.5cm 【注意】 (1)尽早恢复血流灌流,缩短缺血时间 (2)再灌注时遵循低温、低压、低钙的原则 (3)清除活性氧 (4)Ca2+拮抗剂的使用 (5)减少白细胞的激活和炎性介质的释放 (6)补充能量及促进能量生成 (7)启动细胞内源性保护机制 【如何防治I/R】 【实验报告要点】 *
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