惊厥持续状态幼年大鼠海马中葡萄糖调节蛋白78和半胱氨酸门冬氨酸特异性蛋白酶12的表达和依达拉奉对其影响详解.pdfVIP

惊厥持续状态幼年大鼠海马中葡萄糖调节蛋白78和半胱氨酸门冬氨酸特异性蛋白酶12的表达和依达拉奉对其影响详解.pdf

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生垡』L魁盘!蓝;Q!!笙!』j笙!!登笙!期g!i!』£型也!:』!!!!型!Q!!:!!!:塑,盟!:! ·53· .论著 惊厥持续状态幼年大鼠海马中葡萄糖 调节蛋白78与半胱氨酸门冬氨酸 特异性蛋白酶12的表达及 依达拉奉对其影响 李光乾王海萍蒋春明 【摘要】 目的观察幼年大鼠惊厥持续状态(statusconvulsion,SC)后脑组织海马中内质网分子 伴侣葡钧糖调爷蛋白78(glucoseregulatedprotein,GRP78)、半胱氨酸门冬氨酸特异性蛋白酶12 (Caspase.12)的表达及神经细胞凋亡的变化,并探讨依达拉奉(edaravone,ED)对三者的影响。方法 将195只SD幼年雄性大鼠随机分为乍理盐水对照组(NS组)、惊厥持续状态组(SC组)和依达拉奉 预处理组(ED组),每组65只,各组均按sc后处死时间点分为4、12、24、48、72h五个亚组,每组13 只。采用氯化锂一匹鲁忙品化学点燃法制备幼年大鼠sc模型。应用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR) 法检测GRP78 mRNA和Caspase.12mRNA的表达,免疫组化法检测大鼠海马中GRP78和Caspase一12 蛋白表达情况,TUNEL法枪测神经细胞凋亡数的变化。结果(1)免疫组化结果显示sC组幼年大鼠 海马中GRP78(12h组0.1480±0.0164,24h组0.1682±0.0114,48h组0.1540±0.0102)和Caspase- 12(12h组0.1325±0.0165,24h组0.17944-0.0213,48h组0.15254-0.0423。72h组0.1309± 0.0199)表达增强.与NS组(GRP78:12h组0.12144-0.0147,24h组0.12724-0.0177,48h组0.1260 h h组0.1050±0.012l,24h组0.1041±0.015l,48h组0.10584-0.0222,72 4-0.0157;Caspase-12:12 h 组0.10364-0.0186)比较差异有统计学意义(P0.01或0.05);与SC组比较。ED组GRP78(12 h组0.1721 组0.15504-0.0131,24h组0.18864-0.0154,48 4-0.0151)表达明显增强,而Caspase-12 (12h组0.121l4-0.0184,24h组0.15454-0.0205,72h组0.10854-0.0219)表达明显降低,差异均有 mRNA 统计学意义(P0.01或P0.05);(2)RT-PCR法检测结果显示GRP78mRNA和Caspase-12 表达趋势与蛋白基本相似;(3)sc组在惊厥12h(11.414-2.37)时间点海马CA。区TUNEL阳性细胞 数已硅著高于NS组(P0.01),48h(28.784-5.11)达峰,而ED组TUNEL阳性细胞数在12~72h时 h组13.094-2.54,48 间点(12h组8.98±2.22,24 h组20.57±4.89)均较sc组硅著下降(P0.Ol h组6.22 或P0.05),但仍高于NS组(124-1.50,24h组6.57±1.6l,48h组6.72±1.14)(P0.01 或P0.05),在4h时l’甘J点三组(NS组6.29±I.49.sC组6.614-I.71,ED组5.75±1.41)间TUNEL 阳性细胞数蔗异无统计学意义(P0.05)。结论sc后大鼠海屿GRP78和Caspase·12的表达增强. ED町卜调旺鲁忙品致瘌大鼠海马GRP78和下调Caspase-12的表达,并使神经细胞凋亡数减少;提示 ED对SC引起的呐损伤叮能有保护作用。 【关键词】 发作;热休克蛋FI质类;半胱氨酸天冬氨酸蛋门酶12;细胞凋

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