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专题一 基因工程 蜘蛛能够吐出蛛丝 资料二 以往，治疗糖尿病的胰岛素是从动物胰腺中提取的，从100千克猪、牛等动物的胰腺只能提取3－4克胰岛素，治疗一个患者需宰杀40－50头牛，这种药物的造价就可想而知了。 基因工程概念 基因工程：又叫_______技术或_______技术。就是按照人们的意愿，把一种生物的某种基因提取出来，加以修饰和改造，然后放到另一种生物的细胞里，定向的改变生物的遗传性状。 基因工程是唯一的_______变异 基因的剪刀—— 基因的针线—— 基因的运输工具—— 　 　 二、“分子缝合针” —— DNA连接酶 　 三、“分子运输车” ——基因进入受体细胞的载体 ⒈载体需要的条件： 　　⑴有1~多个限制酶切点 　　⑵对受体细胞无害 　　⑶导入基因能在受体细胞中复制并稳定保存 　　⑷有某些标记基因，便于筛选 ⒉常用运载体： 　 ⑴细菌的质粒 　 ⑵λ噬菌体衍生物或某些动植物病毒 小结 　⑶假如目的基因导入受体细胞后不能复制，转基因生物能有预想的效果吗？ 　⑴作为分子运输车——载体，如果没有切割位点将会怎样？ 　⑵霍乱菌的质粒多个限制酶切点，你会用它来做分子运输车吗？ 　⑷目的基因有没有进入受体细胞，如何去发现？ 常用的载体：质粒 能复制并带着插入的目的基因一起复制 有切割位点 有标记基因的存在，可用含氨苄青霉素的培养基鉴别 * 资料一：蛛丝是自然界最奇特的物质之一，它具有极强的韧度，其韧度是同样直径钢材的好几倍。但与家蚕不同，蜘蛛不能家养，因为它们会互相吞食，所以不可能建立人工饲养蜘蛛的农场。30多年来，科学家们一直试图找到利用其他生物体来制造蛛丝的办法。 能不能让蚕“吐出”蜘蛛丝 微生物可以有分泌产物，且微生物繁殖速率快 能否让微生物产生出人的胰岛素、干扰素等珍贵的药物？ 经过多年的努力，科学家于20世纪70年代创立了可以定向改造生物的新技术——基因工程。 原理: 基因重组 基因拼接 DNA重组 定向 不同物种的基因能拼接在一起的原因是： DNA分子都是由4种脱氧核苷酸构成的， 都有规则的双螺旋结构 一物种的基因能在另一物种的细胞内表达的原因 是： 生物界共用一套密码子 限制性核酸内切酶（限制酶）。 DNA连接酶 运载体 1.1 DNA重组技术的基本工具 你能推测限制酶存在于原核生物中的作用是是什么吗？ 原核生物易受自然界外源DNA的入侵，但生物在长期的进化过程中形成了一套完善的防御机制，以防止外来病原物的侵害。限制酶就是细菌的一种防御性工具，当外源DNA侵入时，会利用限制酶将外源DNA切割掉，以保证自身的安全。所以，限制酶在原核生物中主要起到切割外源DNA、使之失效，从而达到保护自身的目的。 1、限制性核酸内切酶----“分子手术刀” 主要来自原核生物 (1)来源： 思考与探究 P7 （2） 为什么限制酶不剪切细菌本身的DNA？ 通过长期的进化，细菌中含有某种限制酶的细胞，其DNA分子中或者不具备这种限制酶的识别切割序列；或者通过甲基化酶将甲基转移到所识别序列的碱基上，使限制酶不能将其切开。这样，尽管细菌中含有某种限制酶也不会使自身的DNA被切断，并且可以防止外源DNA的入侵。 特点及作用 （专一性） 限制性核酸内切酶 磷酸二酯键 T 1 2 3 4 5 A 1 2 3 4 5 H H H H HO T 1 2 3 4 5 A 1 2 3 4 5 H H H H O H2O + O 区别 DNA解旋酶 限制酶 限制性内切酶与DNA解旋酶的区别 切割特定的核苷酸序列的磷酸二酯键 将DNA两条链的氢键打开形成两条单链 区别 DNA水解酶 限制酶 限制性内切酶与DNA水解酶的区别 切割特定的核苷酸序列的磷酸二酯键，形成片段的DNA. 切割磷酸二酯键，形成单个的脱氧核苷酸。 (1)作用于a(磷酸二酯键)的酶有： 限制酶、DNA连接酶、DNA聚合酶、DNA水解酶。 (2)作用于b(氢键)的酶是解旋酶。 限制酶的识别序列： 能被限制性内切酶特异性识别的切割部位都具有回文序列： 在切割部位，一条链正向读的碱基顺序与另一条链反向读的顺序完全一致。 EcoRⅠ 黏性末端　　　　 黏性末端 Go back EcoRⅠ 黏性末端　　　　 黏性末端 重复演示 什么叫黏性末端？ 被限制酶切开的DNA两条单链的切口，带有几个伸出的核苷酸，它们之间正好互补配对，这样的切口叫黏性末端。 SmaⅠ 平末端　　　平末端 限制酶切割一次，会产生__个黏性末端或平末端，水解___个磷酸二酯键。 2 2 要想获得某个特定性状的基因必须要用限制酶切几个切口？可产生几个黏