IL-6对THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞ABCA1和ABCG1表达的影响及其机制研究.pdfVIP

目 录 中文摘要2 英文摘要4 正文6 1 前言6 2 实验材料 3 实验方法 4 实验结果13 5 讨论2 1 6 结论23 参考文献24 附录30 主要英文缩略语索引30 文献综述32 硕士期间发表的论文45 致谢46 1 IL-6 对THP-1 巨噬细胞源性泡沫细胞ABCA1 和 ABCG1 表达的影响及其机制研究 硕士研究生：肖 继 导 师：唐朝克 教授 中 文 摘 要 目的：本研究旨在探讨白介素-6 （IL-6 ）对THP-1 巨噬细胞源性泡沫细胞三磷酸 腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)和三磷酸腺苷结合盒转运体G1(ABCG1)表达和胆 固醇流出的影响，并进一步探讨其可能机制。 方法: THP-1 单核细胞经佛波酯诱导贴壁后，加入 oxLDL 诱导其转化为泡沫细 胞，经各种因素处理后，用实时荧光定量PCR 和Western 印迹分别检测基因和 蛋白质的表达，运用液体闪烁计数法检测细胞内胆固醇流出，高效液相色谱法分 析细胞内总胆固醇、游离胆固醇和胆固醇酯的含量。 结果: 实验结果表明，IL-6 能够明显降低THP-1 巨噬细胞源性泡沫细胞ABCA1 和ABCG1 的表达，抑制细胞内胆固醇的流出。IL-6 也能够下调肝X 受体α （LXR α ）的表达，抑制LXR 特异性激动剂T0901317 对ABCA1 和ABCG1 的表达。 相反， LXR α-siRNA 能逆转IL-6 下调ABCA1 和ABCG1 的作用。同时，IL-6 呈剂量和时间依赖性诱导JAK 1/STAT3 的活化，JAK 1 抑制剂piceastannol 能够 2 抑制IL-6 的活化。此外，STAT3 小分子干扰RNA 和piceastannol 能够逆转IL - 6 对LXR α、ABCA1 和ABCG1 的抑制作用。 结论：IL-6 能抑制THP-1 巨噬细胞源性泡沫细胞ABCA1 和ABCG1 表达及胆固 醇流出。这可能是IL-6 通过活化JAK1-STAT3 信号途径下调LXR α 水平，从而 降低细胞内ABCA1 和ABCG1 表达及细胞内胆固醇的流出。 关键词：三磷酸腺苷结合盒转运体A1 ，三磷酸腺苷结合盒转运体G 1，白细胞介 素6，肝X受体，动脉粥样硬化。 3 Effect and Probable Mechanism of Interleukin-6 on Expression ofABCA1 and ABCG1 in THP-1 Macrophage-Derived Foam Cells [ABSTRACT] OBJECTIVE: The aim of the present study was to determine the effects and potential mechanisms of IL-6 on ABCA1 and ABCG1 expression and cholesterol efflux in human macrophage foam cells. MEHTODS: In the present study, Human THP-1 cells pre-incubated oxLDL served as foam cell models. Specific mRNA was quantified by real-time PCR, protein expression by Western blotting. Liquid scintillation counting and high