原创力文档- 1、本文档共70页，可阅读全部内容。
- 2、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。
- 3、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击 这里二次下载。
- 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
- 5、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
- 6、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
- 7、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
- 8、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次， 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
查看更多
可删除标记基因表达载体的构建毕业论文
ConstructionofexpressionvectorofexcisionMarkers
ConstructionofexpressionvectorofexcisionMarkers
CCoonnssttrruuccttiioonnooffeexxpprreessssiioonnvveeccttoorrooffeexxcciissiioonnMMaarrkkeerrss
ADissertationSubmitted to
ShiheziUniversity
ShiheziUniversity
SShhiihheezziiUUnniivveerrssiittyy
InPartialFulfillmentoftheRequirements
FortheDegreeof
MasterofAgriculture
MasterofAgriculture
MMaasstteerrooffAAggrriiccuullttuurree
By
By
BByy
WangHewei
WangHewei
WWaannggHHeewweeii
(ClinicalVeterinaryMedicine)
(ClinicalVeterinaryMedicine)
((CClliinniiccaallVVeetteerriinnaarryyMMeeddiicciinnee))
DissertationSupervisor:Prof.ZhangYinguo
AssociateProf.ZhouPing、WangLimin
May,2013
课题来源：新疆生产建设兵团博士资金专项
2011BB0
2011BB0
项目编号BBB00
摘 要
摘 要
摘摘 要要
目的：Cre/loxP重组系统是应用最广阔，研究最多的特异性重组系统，为了消除
由非目的基因对转基因细胞和动物带来的影响，更好的研究转入基因的单一功
能，本实验利用Cre/loxP特异性重组系统构建可删除标记基因载体，构建的载体
是以可以产生特异性红色荧光的商业化载体DsRed2-1 为骨架，加入了LoxP 序
列，并加入了MCS序列，有利于目的基因的插入，同时也克隆了CMV启动子，
合成了TK-IRES 序列，为生产较为安全的转基因动物奠定了基础，为他人利用
这些基因序列构建不同用途的载体，满足不同的实验需要奠定了基础。
方法：(1)克隆CMV 启动子，人工合成了LoxP-MCS-LoxP 序列，先后连接到
DsRed2-1载体上构建真核表达载体上，命名为pCMV-Red-LoxP，人工合成Cre
重组酶序列，连接到 pTRE-tight 载体上，然后将 tight-Cre 片段连接到
pCMV-Red-LoxP 载体上，构建成疑似的pCMV-Tt-Cre-LoxP-Dsred 载体。(2)人
工 合 成 TK 基 因 序 列 ， 连 接 到 pCMV-Red-LoxP 载 体 上 ， 命 名 为
pCMV-Red-LoxP-TK，用该载体转染新疆细毛羊成纤维细胞，观察结果。(3)利用
限制性
文档评论（0）