第3篇核酸化学2.pptVIP

基因诊断Gene Diagnosis 基因变异致病的类型： 内源基因的变异 基因结构的突变 点突变、插入、缺失、重排、异位 基因表达异常 mRNA剪接异常 外源基因的插入 基因治疗 基因治疗的必要条件 发病机制在DNA水平上已经清楚 要转移的基因已经克隆分离，其表达产物有详尽的了解 该基因正常表达的组织可在体外进行遗传操作 理想的基因治疗还必须： 外源基因可有效导入靶细胞 外源基因能在靶细胞中长期稳定存留 导入基因能适量表达 导入基因的方法及载体对宿主细胞安全无害 自杀基因的基因治疗 原理：即用（逆转录）病毒载体将编码某种酶的基因（自杀基因）转染到肿瘤细胞中，此酶可将一种无害的药物前体转变为细胞毒复合物，进而杀伤肿瘤细胞（肿瘤细胞不能复制而死亡）。这种基因载体只能在特定的组织或肿瘤中表达，而正常细胞中不表达。 自杀基因 + 病毒载体 转染 重组载体 例如： 单纯疱疹病毒 哺乳动物细胞 HSV Gene-TK （在肿瘤细胞中表达，正常细胞中不表达） Gene—TK GCV（胸苷类似物） TdR P p GCV---p 抑制DNA合成 脱氧胸苷酸 肿瘤细胞死亡 邻近细胞死亡/凋亡（旁观者效应） 第四节 基因工程简介 基因工程 基因工程是指在试管内应用人工方法进行基因重组，把重组的基因导入细胞或细菌，进行复制，转录和翻译，利用这一技术可以扩增DNA，生产蛋白质或是创造生物新品种。主要包括三个步骤：目的基因的制备；目的基因的转移；引进的目的基因的表达 第五节 核酸类药物 一.具有天然结构的核酸类药物 包括肌苷、ATP、辅酶A、脱氧核苷酸等等。 这些药物有助于改善机体的物质代谢和能量代谢，加速受损组织的修复。 二.自然结构碱基、核苷、核苷酸结构的类似物或聚合物 包括5-氟尿嘧啶、三氟代胸苷、叠氮胸苷等等。 结构特点：都是自然结构碱基（A,T,C,G,U)、核苷、核苷酸结构的类似物或聚合物，来源于自然结构的核酸类物质进行半合成、结构改造、酶法合成等所得。 作用特点：外源性嘧啶和嘌呤的类似物进入肿瘤细胞不易被分解，停留的时间长，干扰了肿瘤细胞核酸代谢的功能，从而抑制了肿瘤细胞的生长，在临床上主要用于抗肿瘤、抗病毒等。 * * 欢 迎 欢 迎 基因诊断—以DNA或RNA为诊断材料，通过检查基因的存在、缺陷或表达异常，对人体状态和疾病作出诊断的方法和过程 基因治疗（gene therapy）——就是向有功能缺陷的细胞补充相应功能基因，以纠正或补偿其基因缺陷，从而达到治疗的目的。 对象： 体细胞 生殖细胞 药物前体 无毒 Gene→酶→ ↓ 　　　　 药物复合物 有毒 细胞死亡 “自杀基因” 疗法 “自杀基因” 疗法 ? “自杀基因” 疗法 ? “自杀基因” 疗法 以 质 粒 为 载 体 的 DNA 克 隆 过 程 目 录